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实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 鱼红细胞生成素(EPO)elisa试剂盒 |
英文名称 | Fish erythropoietin,EPO ELISA kit |
货号 | GOY-F74840 |
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
三氧化二铬(>99%,BR)CD71 (D7G9X) XP® Rabbit mAb溴-2-硝基三氟
四氧化三钴(>99%,BR)CD71 (D7G9X) XP® Rabbit mAb甲酸酯
酸钴四水(>99.5%,BR)UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb甲酰-2-酸酯
钴粉(>99%,BR)N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb氧基甲酸
铜粉(>99.5%,BR)N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb2-甲基-5-磺酰
式碳酸铜(铜纯度:52.5~56.5%)LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)2-氟
氧化铜粉(>99%,BR)LSm2 (D9X6C) Rabbit mAb十二烷基噻吩
焦铜iNOS (D6B6S) Rabbit mAb2,二羟基-甲
铜三水(>98%,BR)Phospho-SQSTM1/p62 (Thr269/Ser272) Antibody5-溴-甲基-1H-吲唑
2'-脱氧腺苷5'二酸三钠盐(>97%,BR)PFKFB3 (D7H4Q) Rabbit mAb酰基-7(1H)-氮杂吲哚
2'-脱氧胞苷-5'-二酸三钠盐(分子生物学级)PathScan® Phospho-HER4/ErbB4 (panTyr) Sandwich ELISA Kit2-溴-1,二-5-氟
(>98%,BR)IFITM1 Antibody酸
DMPPathScan® Total HIF-1α Sandwich ELISA Kit8-硝基喹啉
没食子酸月桂酯(>98.5%,BR)Phospho-FoxO3a (Ser253) (D18H8) Rabbit mAb氨基-5-三氟甲
dUMP;2'-脱氧尿苷-5'-酸二钠盐MT1-MMP (D1E4) Rabbit mAb2-溴-6-并噻唑
盐酸盐(>98%,BR)MMP-2 (D8N9Y) Rabbit mAb1-己基-2,二甲基咪唑三氟甲磺酸盐
呋喃三二钠盐TRF2 (D1Y5D) Rabbit mAb苄基二膦
吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷(>98%,BR)SignalSilence® IRF-7 siRNA I5-溴-2-甲氧基甲
鱼红细胞生成素(EPO)elisa试剂盒5(6)-羧基荧光素 95%原癌基因2抗体血液乙酰胆碱酯酶活性化学发光法定量检测试剂盒偶氮二甲酸二异酯 95%岩白菜素5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 96%赖氨酰氧化酶样蛋白4抗体血液乙酰胆碱酯酶活性荧光法定量检测试剂盒溴化镁(六水) 98%木栓6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 90%乳铁蛋白抗体血液异戊二焦磷酸异构酶(isopentenyl pyrophosphate isomerase)活性比色法定量检测试剂盒4-甲磺酰异酸酯 96%莲心碱高酸盐5- 羧基荧光素二乙酸酯 95%层粘连蛋白1+2抗体血液游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒碳酸二酯 99%1-羟基-3,4,5-*氧基山异硫酸荧光素(异构体I) 90%富含亮氨酸重复蛋白15抗体血液游离氨基酸含量荧光定量检测试剂盒硫代乙酸铵 试剂级,70%溶液相思子碱异硫酸荧光素 96%受体蛋白酪氨酸磷酸酶F抗体血液游离胆固酶连续循环比色法定量检测试剂盒叔丁基异硫酸酯 99%柳穿鱼黄素二乙酸荧光素 97%磷酸化5-脂氧合酶抗体血液游离胆固酶连续循环荧光定量检测试剂盒巯基乙酸乙酯 98%络石苷3-甲 99%低分子质量蛋白2抗体血液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶((iNOS /NOS2/mNOS))活性比色法定量检测试剂盒3-巯基酸 98%荆芥
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。