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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-0161125-1 |
商品介绍:
测定意义: SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷键,催化葡萄糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相应的葡萄糖基低聚糖。此外,SP还能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。 测定原理: SP能够以磷酸为受体,催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率,即可计算SP活性。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
泛su相关蛋白1抗体(鼻咽癌相关基因20蛋白)皱孢链霉菌人羊膜上皮
广泛表达转录蛋白UXT抗体普通变形杆菌人羊膜间充质基质
泛suD抗体哈茨木霉MN-h, 小鼠海马神经元
珠蛋白抗体紫红曲霉MLF, 小鼠淋巴成纤维
尿卟啉原脱羧酶抗体环带拟盘多毛孢RN-h, 大鼠海马趾神经元
磷酸化信号淋巴活化分子CD150抗体桔青霉RLF, 大鼠淋巴成纤维
泛su激活酶2B抗体嗜松青霉mCF, 小鼠心脏成纤维
ATP-依赖的RNA解旋酶p47抗体薄花边伞2-1Trequinsin(PDE III 抑制剂 )2mg
等上游激因子1抗体扩展青霉Vinblastine( 长春新 )100μL规格
泛su化组蛋白H2AX抗体镰刀菌U0126(MEK1/2 抑制剂 )1mg
TH糖蛋白抗体串珠镰刀菌*Trichostatin A(HDAC 抑制剂 )100μg规格
纺锤体和着丝粒相关蛋白1抗体芽孢杆菌Tocopherol( 抗氧化剂 )2g
转录辅助因子退变样蛋白3抗体酿酒酵母Superoxide dismutase( 抗氧化酶 )2mg规格
转录辅助因子退变样蛋白1抗体淡黄湿伞星形胶质生长因子5mL规格
病抑制蛋白Viperin抗体球孢枝孢支气道上皮生长因子5mL
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒微量法补体成分5(C5)试剂盒Anti-CYP2B6 AntibodyRH血型C糖蛋白
TATA框结合蛋白/TBP相关因子(TAF)试剂盒Anti-CYP2E1 Antibody磷酸化雷帕霉su靶蛋白复合体2
巨噬清道夫受体1 (MSR1)试剂盒Anti-CYP2E1 Antibody环指蛋白138
转录因子20(TCF20)试剂盒Anti-CYP2E1 Antibody(PB0186)Nogo66受体相关蛋白3
褪黑su(MT)试剂盒Anti-CYP2S1 AntibodyRas相关区域家族1A
趋化su样因子超家族成员4(CKLFSF4)试剂盒Anti-CYP2U1 AntibodyRh血型C抗原
蛋白激酶抑制剂α(PKIα )试剂盒Anti-CYP3A4 Antibody(PB1111)RAS家族关联结构域蛋白6