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以下是节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书的订购信息:
产品名称 | 规格 | 价格 |
节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书 | 50T | 电询 |
需要自备的器材:
1.节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
PCR检测试剂盒:
(一)节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-15min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
技术概论:
节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
PCR反应体系与反应条件
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
以下是公司正在热销的产品:
α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)elisa英文名称:α2ML1 ELISA Kit,英文缩写:α2ML1,产品别名:α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)ELISA,α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
Tescalcin蛋白(TSC)elisa英文名称:TSC ELISA Kit,英文缩写:TSC,产品别名:Tescalcin蛋白(TSC)ELISA,Tescalcin蛋白(TSC)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
VEGF共调节趋化因子1(VCC1)elisa英文名称:VCC1 ELISA Kit,英文缩写:VCC1,产品别名:VEGF共调节趋化因子1(VCC1)ELISA,VEGF共调节趋化因子1(VCC1)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
Smad同源物1(Smad1)elisa英文名称:Smad1 ELISA Kit,英文缩写:Smad1,产品别名:Smad同源物1(Smad1)ELISA,Smad同源物1(Smad1)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
R-脊椎蛋白3(RSPO3)elisa英文名称:RSPO3 ELISA Kit,英文缩写:RSPO3,产品别名:R-脊椎蛋白3(RSPO3)ELISA,R-脊椎蛋白3(RSPO3)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
PTB结合核蛋白2(RAVER2)elisa英文名称:RAVER2 ELISA Kit,英文缩写:RAVER2,产品别名:PTB结合核蛋白2(RAVER2)ELISA,PTB结合核蛋白2(RAVER2)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
N-酰转移酶5(NAT5)elisa英文名称:NAT5 ELISA Kit,英文缩写:NAT5,产品别名:N-酰转移酶5(NAT5)ELISA,N-酰转移酶5(NAT5)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
Nischarin蛋白(NISCH)elisa英文名称:NISCH ELISA Kit,英文缩写:NISCH,产品别名:Nischarin蛋白(NISCH)ELISA,Nischarin蛋白(NISCH)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
Misato同源物1(MSTO1)elisa英文名称:MSTO1 ELISA Kit,英文缩写:MSTO1,产品别名:Misato同源物1(MSTO1)ELISA,Misato同源物1(MSTO1)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
Kintoun蛋白(KTU)elisa英文名称:KTU ELISA Kit,英文缩写:KTU,产品别名:Kintoun蛋白(KTU)ELISA,Kintoun蛋白(KTU)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
G抗原10(GAGE10)elisa英文名称:GAGE10 ELISA Kit,英文缩写:GAGE10,产品别名:G抗原10(GAGE10)ELISA,G抗原10(GAGE10)产品保存:2~8℃、有效期6个月。
Midline 1蛋白(MID1)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
Midline 2蛋白(MID2)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
Misato同源物1(MSTO1)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
Misato同源物1(MSTO1)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
MRG结合蛋白(MRGBP)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
Muskelin 1蛋白(MKLN1)(酶联免疫吸附试验法) 现货供应
节瘤拟杆菌PCR检测试剂盒说明书*人急性淋巴细胞白血病细胞,CCRF-CEM细胞英文名称:
*人急性淋巴细胞白血病细胞,CEM/C1细胞英文名称:
*人状腺癌状细胞,Bcpap细胞英文名称:
*人状腺癌细胞,FTC-133细胞英文名称:
*人状腺癌细胞,K1细胞英文名称:
*人状腺癌细胞,SW579细胞英文名称:
*人状腺癌细胞,TT细胞英文名称:
人状腺癌细胞,K1细胞*
人状腺癌细胞,SW579细胞原装/进口
人状腺癌细胞,TT细胞
人肺成纤维细胞,HPF细胞原代细胞*
人肝Kuffer细胞原代细胞原装/进口
人肝癌原代细胞原代细胞
人肝单核细胞,HLMC细胞原代细胞*
人肝窦内皮细胞,HHSECP细胞原代细胞原装/进口