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上海市所在地
特点:
1.即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2.灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
3.一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
4.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
5.本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | 元胡LAMP鉴定试剂盒 |
英文名称 | Rhizoma corydalis |
规格 | 50次 |
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
用于鉴别耐的弧菌对杞橼酸盐和无机铵的利用能力。(鉴定霍乱弧菌) 1%NaCl西蒙氏杞橼酸盐生化鉴定管 20支/盒
用于鉴别耐的弧菌利用糖源的能力。 1%NaCl蔗糖生化鉴定管 20支/盒
用于样品的稀释。(GB 4789.13-2010) 1%蛋白胨水 250g
用于白色念珠菌芽管试验的培养(2010版中国药典) 1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基 250g
用于白色念珠菌芽管试验的培养 1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基 100g
每支添加于1000mL的1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基(021105)中. 1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基配套试剂 10支/盒
用于苯丙氨酸脱氨酶试验. 10% FeCl3试剂(苯丙氨酸试剂) 10ml/支
用于弧菌的耐盐试验。 10%NaCl胨水生化鉴定管 20支/盒
用于金黄色葡萄球菌的多管发酵法测定及增菌培养。 10%胰蛋白胨大豆肉汤 90mmX20个
用于金黄色葡萄球菌的多管发酵法测定及增菌培养。 10%胰蛋白胨大豆肉汤 225ml/X10袋
用于金黄色葡萄球菌的多管发酵法测定及增菌培养(GB/T4789.10-2008)。 10%胰酪胨大豆肉汤 250g
用于弧菌的耐盐试验。 11%NaCl胨水生化鉴定管 20支/盒
用于弧菌的耐盐试验。 2%NaCl胨水生化鉴定管 20支/盒
嗜二氧化碳菌培养:每袋用于2.5L厌氧体积。 2.5LCO2产气剂 10袋/包
使用2.5L厌氧产气剂一袋;可装12个培养皿。 2.5L密封培养灌 19.7x13.5x9.5cm
元胡LAMP鉴定试剂盒微需氧菌培养:每袋用于2.5L厌氧体积。 2.5L微需氧产气剂 10袋/包
严格厌氧菌培养:每袋用于2.5L厌氧体积。 2.5L厌氧产气剂 10袋/包
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。