活性氧 (Reactive oxygen species，ROS) 是一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应活性的一类含氧分子，参与细胞信号转导、免疫防御以及维持体内动态平衡等各项生理活动。然而当细胞处于环境压力时，胞内的 ROS 含量水平就会急剧上升造成核酸、蛋白和脂类物质的氧化损伤，从而引起许多生理、病理变化，诸如男性不育、癌症的发生等等。

胞内 ROS 含量水平通常采用荧光探针，尤其绿色荧光探针来检测。然而由于绿色荧光检测和成像易受细胞自发荧光的影响，因此远/近红外染料常被用来检测 ROS 含量从而避免细胞自发荧光的干扰。

SpectraMax® iD5 多功能微孔读板机采用超冷型 PMT 和“2X2”光栅光路设计，可有效降低信号背景减少杂散光，为远红外荧光检测提供更宽的动态范围和更高的灵敏度。这里我们展示的是如何利用 SpectraMax iD5多功能微孔读板机和 2 个荧光检测试剂盒来进行胞内 ROS 含量分析的。在 Spectral
Optimization Wizard 帮助下，我们优化了远红外分析检测下激发光和发射光的不同波长组合，并最终比较了绿色荧光检测和远红外荧光检测结果的表现。