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培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
英文名称：
产品规格：100ml|500ml
货号：FS-X10052
产品介绍:
用途： 退行性染色液，适用于石蜡切片染色 注意事项： Gill No.3苏木素染色液又称GillⅢ液，为正常浓度的2倍，石蜡切片染色大于15分钟。属于半氧化苏木素，比Harris苏木素稳定，染色需盐酸乙醇分化，其缺点是：黏附的明胶甚至玻片也会染色。 储存条件：室温，12个月 |
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
路德酵母7号染色体开放阅读框13抗体Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) 人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫试剂盒
蓝色犁头霉7号染色体开放阅读框29抗体Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) 人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒
贪噬菌属8号染色体开放阅读框72抗体Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) 人巨噬来源的趋化因子(MDC/CCL22)免疫试剂盒
赖芽孢杆菌7号染色体开放阅读框30抗体Human CD5L(CD5 antigen-like) 人巨噬集落激因子受体(M-CSFR)免疫试剂盒
奇异球菌7号染色体开放阅读框57抗体Human FAM3B(Protein FAM3B) 人巨噬集落激因子(M-CSF)免疫试剂盒
胶红酵母7号染色体开放阅读框36抗体Human MYOF(Myoferlin) 人巨噬激蛋白(MSP)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清诊断液 ○1547号染色体开放阅读框42抗体Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) 人巨泌乳免疫试剂盒
马腺疫链球菌兽疫亚种7号染色体开放阅读框43抗体Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) 人盐抵抗的性磷(TRAP)免疫试剂盒
冷海水黄杆菌7号染色体开放阅读框44抗体Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5–>4-isomerase type 1) 人相关抗原9(SPAG9)抗体免疫试剂盒
暗产色链霉菌*8号染色体开放阅读框40抗体Human ATG12(Ubiquitin-like protein ATG12) 人相关抗原7(SPAG7)免疫试剂盒
亮白曲霉8号染色体开放阅读框37抗体Human FOLR2(Folate receptor beta) 人精脒/精N(1)-乙酰转移样蛋白1(SATL1)免疫试剂盒
枇杷叶点霉8号染色体开放阅读框45抗体Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) 人精合成(SRM)免疫试剂盒
胶柱头孢霉属8号染色体开放阅读框80抗体Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) 人精酰-tRNA合成(RARS)免疫试剂盒
Paenibacillus taichungensis9号染色体开放阅读框3抗体Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) 人精脱羧(ADC)免疫试剂盒
植物乳杆菌8号染色体开放阅读框47抗体Human NOTCH2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) 人精2(ARG2)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌8号染色体开放阅读框48抗体Human NOTCH4(Neurogenic locus notch homolog protein 4) 人精(Arg)免疫试剂盒
尖镰孢萎蔫专化型（棉花枯萎病菌）Fusarium│oxysporum f. sp. vasinfectum 质量规格：IND Liprin alpha 1 三七皂R2(S型)
蓝色链霉菌Streptomyces│cyaneus 质量规格：IND KIAA1199 异夏佛塔
假木豆根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格：AR,90%白头翁皂E-3
Gill苏木素染色液(Gill No.3)硬结节杆 4-甲基邻苯二白关联球蛋白样受体1
鞘氨 4-氟-2-甲白关联球蛋白样受体2
*灰葡萄孢 甘油缩甲γ谷氨酰转移
粪肠球 3-溴-5-甲甲酯（易）酪激受体B
毛霉属 环戊基苯β位淀粉样前体蛋白裂解2
弓形虫(GJS-3株) 盐特拉唑磷化蛋白激C亚性D型
北京掷孢酵母 2-甲氧基-6-突触核蛋白β
盖替隐球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮丰富重复G蛋白偶联受体5
浅灰小双孢 1-(4-吡啶基)酮激锚定蛋白4
广西腐霉 3-氨基-2-吡啶紧密连接蛋白4
黑曲霉 4-环己酮羧甲酯可溶性Klotho蛋白
空肠弯曲杆 5--1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不饱和脂肪
近缘毛壳 3-乙酰氨基邻苯二甲酐饱和脂肪
鞘氨杆 1,7-二-4-氧杂庚烷人可溶性Endoglin
酿酒酵母 5-香草蛋白激D2
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
