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产品介绍：
CFSE/PI 双染细胞毒性检测试剂盒是利用细胞荧光染料CFSE(CFDA-SE)和PI对细胞进行染色，利用CFSE标记靶细胞，PI标记死的靶细胞来区分不同的细胞，活的靶细胞成绿色，死的靶细胞成红色和绿色，从而检测细胞毒性作用。根据不同的实验方案设计，可以用来检测化合物的细胞毒性作用。也可以用来检测杀伤性T 细胞或NK 细胞介导的细胞毒作用。 CFDA-SE 是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。CFDASE是一种带有琥珀酰亚胺(NHS)的荧光染料，可以结合细胞内的蛋白质。CFDASE在结构上将酚羟基部位改造成AM体，所以自身不发荧光，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，进入细胞内的CFDASE的AM 部位能被细胞内酯酶水解生成CFSE，通过共价结合赖氨酸侧链的氨基而掺入细胞内和细胞表面的蛋白，且结合后发出强的绿色荧光。CFSE的琥珀酰亚胺(NHS)和细胞内蛋白质的氨基部位结合，固定在细胞内，不会漏出细胞外。CFSE进入细胞后定位于细胞膜、细胞质和细胞核，在细胞核的荧光强。 CFSE毒性小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。 CFSE/PI标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞毒性检测。 CFSE标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=496 nm,λem=516 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为516nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。PI标记细胞呈红色荧光，流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为647nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL2 detection channel。 CFSE标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞毒性外，还可单染后用于细胞增殖检测，或者用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。 储存条件：CFSE探针-20℃避光保存；溶解液-20℃保存；PI染色液2-8℃避光保存。 有效期：六个月。 |
产品属性：
产品名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
500T | FS-X9715 |
注意事项：
1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
操作步骤：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
睾(T)英文名：T 载脂蛋白C1抗体包装1g
高铁血红蛋白(MHB)英文名：MHB 载脂蛋白C2抗体包装5g
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)英文名：HMGB-1 载脂蛋白L1抗体包装1g
高迁移率族蛋白1(HMGB1)英文名：HMGB1 载脂蛋白L4抗体包装5g
高敏三碘状腺原(u-T3)英文名：u-T3 载脂蛋白L5抗体包装100g
高敏状腺(u-T4)英文名：u-T4 载脂蛋白M抗体包装25g
高密度脂蛋白胆固(HDL-C)英文名：HDL-C 载脂蛋白O抗体包装500g
高灵敏度促状腺激(U-TSH)英文名：U-TSH β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体包装5g
高尔基蛋白73(GP-73)英文名：GP-73 共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体包装1g
高半胱(Hcy)英文名：Hcy 三号染色体开放阅读框抗体包装1g
干燥综合征抗原B(SSB)英文名：SSB 腺嘌呤磷核糖转移抗体包装1g
干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)英文名：SCF/MGF 磷化通道蛋白2抗体包装25g
干扰诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)英文名：IP-10/CXCL10 ADP核糖基化因子1抗体包装5g
干扰调节因子5(IRF5)英文名：IRF5 乙型肝炎病X相关蛋白2抗体包装1g
肝脂(HL)英文名：HL ADP核糖基化因子5抗体包装5g
溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体转铁蛋白(TRF)Biapenem is a carbapenem antibiotic with activity against both Gram-positive and
CFSE/PI双染细胞毒性检测试剂盒Marisediminicola 1,3-环辛二烯(含稳定剂叔丁基邻苯二酚)含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5
新月弯孢 5,6-二氟-2-羧酸含IQ基元GTP激活蛋白1
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 5,6-二氟和肽
香菇 四金酸三水合物核苷酸还原M1
耐辐射奇球突变株 4-氨基乙酯核基质蛋白22
柱状环伞（柳菇、茶新菇） 4-乙酸乙酯盐酸盐核基质结合区结合蛋白质1
高大毛壳 酸性紫49核仁
Achromobacter denitrificans (S)-5-甲基-2-恶唑烷酮核仁形成区嗜银蛋白
米根霉 DL-炔基甘核糖核酸
嗜果刀孢 4-派啶乙酸甲酯核纤层蛋白A;C
暗产色链霉 1,2-环己基二甲酸二甲酯核心蛋白聚糖
链霉 2,4,5-三氟苄核因子E2相关因子2
大肠埃希氏杆 2,4-二甲基肉桂酸核因子κB
苏云金芽孢杆 2,4-二甲基肉桂酸核因子κB受体活化因子
苹果黑腐皮壳 2-甲基-4-吡啶羧酸甲酯核因子κB受体活化因子配基
