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上海市所在地
英文名称：Brown-Hopp Staining Kit
产品规格：100次
货号：FS-X9877
产品介绍:
产品特点： 1. 操作简单、染色稳定。 2. 适用范围广，可以用于各种石蜡组织切片的染色。 3. 本试剂盒至少可以染色100张切片。 4. 本产品适用于用10%缓冲中性甲酸、2.5%-磷酸缓冲液、-Zenker固定液等固定的组织，但不适用于Bouin固定的组织。 保存条件：常温，有效期半年。 |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
链霉菌双链RNA腺脱基抗体（N端）Human LIN7C 猪肌激同工MB(CK-MB)免疫试剂盒
砖红镰刀菌腺单磷活化蛋白激α2抗体Human LILRA4 猪肌激(CK)免疫试剂盒
嗜热链球菌腺激抗体Human LIMK2 猪肌红蛋白(MB)免疫试剂盒
黑紫红菇α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1Human LGI2 猪肌U型激,线粒体(CKMT1)免疫试剂盒
葡萄座腔菌属凋亡相关蛋白3抗体Human LIMS1 猪饥饿激(GHRL)免疫试剂盒
传染性喉气管炎病肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体Human LGI3 猪活性氧(ROS)免疫试剂盒
齿双歧杆菌ATP结合蛋白家族7抗体Human LIMK2 猪活化蛋白C(APC)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌ASCL2蛋白抗体Human LIMS1 猪黄体生成(LH)免疫试剂盒
副猪嗜血杆菌磷化脊髓小脑失调症蛋白1抗体Human LGI2 猪环磷腺(cAMP)免疫试剂盒
粪产碱菌粪亚种磷化活化转录因子1抗体Human LGP2 猪环磷鸟(cGMP)免疫试剂盒
小孢根霉华变种磷化活化复制因子2抗体Human LGI3 猪化学趋化因子(KC)免疫试剂盒
根瘤菌磷化活化复制因子2抗体Human LGR5 猪红生成(EPO)免疫试剂盒
嗜热脂肪地芽孢杆菌磷化活化复制因子2抗体Human LDLRAD1 猪黑皮质受体-2(MC2R)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌磷化活化复制因子2抗体Human LDOC1 猪核因子-κB(NF-κB)免疫试剂盒
矩圆黑盘孢磷化活化复制因子2抗体Human LEF1 猪核受体亚家族1,H组,成员4(NR1H4)免疫试剂盒
鲑色锁掷酵母磷化活化复制因子2抗体Human LGR6 猪含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激2(Tie-2)免疫试剂盒
桃色拟青霉Paecilomyces│persicinus 质量规格：>98%,BR补体蛋白3试剂盒醉椒
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格：>98%,BR补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1试剂盒异连翘酯A
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 质量规格：>98%(HPLC),USP补体7试剂盒氧海碱
革兰氏菌染色鉴定试剂盒(Brown-Hopp)大肠埃希 3-磺酰基-4-氟沙眼衣原体IgM
玉黑粉 4-苯磺酰脲肝
香菇Cr04 β－内啡肽,鼠前脑源性神经营养因子
大肠埃希氏杆 2,5-二氟苯疱疹病-8型感染IgG抗体
尖孢镰孢 甲基烯十二氟庚酯疱疹病-8型感染IgM抗体
彩色豆马勃 2-(甲硫基)乙酰单纯疱疹病1IgG抗体
荧光假单胞 Cys-Gly, oxidized单纯疱疹病1IgM抗体
尖孢镰刀 1-(4-氟苯基)哌EB病IgG抗体
扁柄侧耳 2--4-氟巨病IgM抗体
红曲红曲 2--5-氟单纯疱疹病2IgG抗体
褐囊蜜环 4-氨基-3-氟吡啶人类嗜T病抗体
酿酒酵母 Nefiracetam型肝炎病抗体
枯草芽孢杆 4-羟基吡啶-2-羧核糖核H
黑曲霉 2-羟基甲酯EB病抗体
酿酒酵母 2-苯氧基血吸虫抗体
