乙醛脱氢酶测试盒50管/48样
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乙醛脱氢酶测试盒50管/48样

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2022-04-13 16:03:10
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产品简介

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检测方法

规格

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乙醛脱氢酶测试盒50管/48样

紫外分光光度法

50管/48样

BJ-01S9537

商品介绍:

测定意义:

乙醛脱氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种,广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸,在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内,线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化,所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注;同时,乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。

测定原理

在辅酶Ⅰ存在的条件下,乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH,在340nm处的吸光值会增加,测定340nm处的吸光值变化,可计算得到乙醛脱氢酶的活性。  

自备实验用品及仪器

天平、离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、蒸馏水。

QQ截图20220307153443.png 

注意事项:

①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用

样品制备:

1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。

2). 过滤混浊溶液。

3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。

4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。

6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10).含脂肪的样品用热水提取。

SIX4 基因全长ORF克隆

NDST3 基因全长ORF克隆

EPHA1 基因全长ORF克隆

OSGIN1 基因全长ORF克隆

EHHADH 基因全长ORF克隆

LRRC15 基因全长ORF克隆

AMHR2 基因全长ORF克隆

CCT4 基因全长ORF克隆

SYT10 基因全长ORF克隆

SREK1 基因全长ORF克隆

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操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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