初级会员第 9 年经销商
参考价:
具体成交价以合同协议为准
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适用范围【参考值】
1.试剂盒有效性判定:
(1)阳性对照:有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
(2)阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。
2.标本结果判定:
(1)阳性:标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增长期。
(2)可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。
(3)阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值。
参数规格:
产品名称:儿茶染料法PCR鉴定试剂盒价格
英文名称:Catechu
货号:YSP8656
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
钡标准溶液 100mg/L,基体: 5%HCl 4-溴-3-基酰苯胺非离子聚烯酰胺Human PDE4D(Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit
Human PDGF(Plaet-Derived Growth Factor) ELISA Kit
铍标准溶液 10μg/ml 3-氯-4-氧基-2-氟苯硼酸COD去除剂Human PDGF-AA(Plaet Derived Growth Factor-AA) ELISA Kit
Human PDGFRβ(Plaet Derived Growth Factor Receptor Beta) ELISA Kit
苯标准溶液0.96mg/ml,溶剂:醇 1-溴-3-氯-4-氧基-2-氟苯水飞蓟素Human PDH E1(Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit
Human PDHα(Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit
生化需氧量(BOD)标准溶液 1000μg/ml 4,6-二氧基-2-巯基嘧啶泰妙菌素(截短侧耳素)Human PDHβ(Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit
Human PDI(Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit
气相色谱仪检定用标准物质(苯-苯溶液)5.03mg/ml,基体:苯 2-基-5-嘧啶醛酞菁蓝Human PDIA2(Protein Disulfide Isomerase A2) ELISA Kit
Human PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit
五日生化需氧量标准品1000mg/L 2-基巯基嘧啶-5-醛覆盆子酮Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit
Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit
水质生化需氧量标样 浓度范围:61.8-148(mg/L),分析标准品 4-溴苯酰苯人参皂苷Rh2Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit
Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit
苯并(b)荧蒽标准溶液 10~100μg/mL,基体:醇 2-溴-3-氨基-5-氯吡啶小球藻粉Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit
Human PF4V1(Plaet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit
苯并(k)荧蒽标准溶液 4.38ug/ml,基体:醇 4-(2-吡啶基)苯硼酸频哪醇酯(1R,2S)-REL-2-(3,4-二氟苯基)环胺盐酸盐Human PFKM(Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit
Human PFKP(Phosphofructokinase, Plaet) ELISA Kit
苯酸标准溶液 1.00mg/ml,基体:石油醚 (3-羟基-4-氧基苯基)硼酸5’-呈味核苷酸二钠Human PGAM1(PhosphoglyceRate Mutase 1) ELISA Kit
Human PGD2S(Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit
儿茶染料法PCR鉴定试剂盒价格 变色酸2-基-4-硝基氧化吡啶 98%美菱冰箱 BCD-201MLT 201升 两门
Anthranilyl-HIV Protease Substrate VI
苦酮酸间三氟基苯酸酯 99%车德克(CEDEKE)DK-3100 多功能10M海蓝水管全铜接头洗车水枪套Anthranilyl-HIV Protease Substrate V
味酸4-哌啶酮盐酸盐,水合 98%上门维修费用Anthranilyl-HIV Protease Substrate IV
溴酚兰钠盐4-氨基三氟苯 98%五氧二锑 99%Anthranilyl-HIV Protease Substrate III
橙黄I邻三氟基苯醛 98%硫化锑 98%Anthranilyl-HIV Protease Substrate
苄橙3-(三氟基)苯酰氯 98%吡螨胺 分析标准品Ac-TVSFNF
煌橙4-(三氟基)苯醛 96%吡螨胺Ac-TLNF-OH
喹哪啶红4-(三氟基)苯酚 97%硬脂酸锌 Zn 10-12%,200目Ac-SQNY-OH
赤藓红3-三氟基苯酸 98%磺胺吡啶 98%Histatin-8
苋菜红四吡喃酮 97%3-溴酮酸酯 90%Histatin-5
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论