初级会员第 9 年经销商
参考价:
具体成交价以合同协议为准
初级会员第 9 年经销商
参数规格:
产品名称:白及PCR鉴定试剂盒规格
英文名称:Rhizoma bletillae
货号:YSP8529
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
适用范围【参考值】
1.试剂盒有效性判定:
(1)阳性对照:有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
(2)阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。
2.标本结果判定:
(1)阳性:标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增长期。
(2)可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。
(3)阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
三基硅烷 99% 苯酸异戊酯常山粉Human TNFRSF13B/TACI(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B) ELISA Kit
Human TNFRSF13C/BAFFR(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C) ELISA Kit
4-溴苯酰氯 96% 苯酸异戊酯川穹粉Human TNFRSF14/HVEM(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14) ELISA Kit
Human TNFRSF4/OX40(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4) ELISA Kit
4-(氯基)苯酰氯 98% 4-氯-2-氟三氟苯猪苓粉Human TNFRSF5/CD40(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5) ELISA Kit
Human TNFRSF9/4-1BB(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9) ELISA Kit
间氯苯酰氯 97% 2-氯-4-氟三氟苯银耳提取物Human TNFSF11/RANKL(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11) ELISA Kit
Human TNFSF13/APRIL(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13) ELISA Kit
4-氯酰氯 98% 2,6-双(三基锡基)二噻吩并[3,2-b:2',3'-d]噻吩前胡粉Human TNFSF14/LIGHT(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 14) ELISA Kit
Human TNFSF4/OX40L(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4) ELISA Kit
2,4-二氯苯酰氯 98% 4-氨基-L-苯氨酸连翘粉Human TNFSF18(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18) ELISA Kit
Human TrkA/NTRK1(High affinity nerve growth factor receptor) ELISA Kit
3,5-二基苯酰氯 97% 2-硝基-4-异基苯橄榄粉Human TSLP(Thymic stromal lymphopoietin) ELISA Kit
Human PLAU/uPA(Urokinase-Type Plasminogen Activator) ELISA Kit
3,4-二氯苯酰氯 97% 茴香酸酯川楝子粉Human VCAM1(Vascular cell adhesion protein 1) ELISA Kit
Human VEGF(Vascular Endothelial Cell Growth Factor) ELISA Kit
2,6-二氯苯酰氯 98% 3-氨基-5-噻吩-2-羧酸酯桦树叶粉Human VEGF-C(Vascular Endothelial Growth Factor C) ELISA Kit
Human VEGFR2/KDR(Vascular endothelial growth factor receptor 2) ELISA Kit
2,3-二氯苯酰氯 98% 基硼酸频哪醇酯毛冬青粉Human WISP1/CCN4(WNT1-inducible-signaling pathway protein 1) ELISA Kit
Human Lptn(Lymphotactin) ELISA Kit
白及PCR鉴定试剂盒规格ADV IgG III 腺病毒 IgG Ⅲ型(间接法二步法)番泻苷C 99%二羰基酰酮铑 99%Haemophilus influenzae
ADV IgG 腺病毒 IgG 混合型(间接法二步法)亚麻木酚素 分析标准品,≥98%三苯基膦醋酸钯 Pd 14.2%Haemophilus paragallinarum
ADRP(Human adipose differentiation-related protein) ELISA Kit 人脂肪分化相关蛋白雷公藤素 分析标准品,≥98%1,4-双(二苯基膦烷)二氯化钯 98%Haemophilus parahemolyticus
ADRA1A(Mouse adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 小鼠肾上腺素能a1A受体牡荆素鼠李糖苷 分析标准品,≥98%双(腈)氯化钯(II) Pd 41.0%Haemophilus parasuis
ADRA1A(Human adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 人肾上腺素能a1A受体牡荆素鼠李糖苷 98%双(二苯基膦)烷 98%Haemophilus somnus
ADRA1A ELISA Kit 大鼠肾上腺素能a1A受体雷公藤内酯 分析标准品,98%1,1'-双(二-叔基膦基)二茂铁 98%Haemophilus spp.
ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit 兔阿霉素雷公藤内酯 98%1,5-双(二苯基膦)戊烷 97%Haemophilus suis
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂联素灿烂酚蓝 试剂级1,1'-双(二苯基膦)二茂铁 97%Haplosporidium costale
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂联素羟基萘酚蓝 IND,94%(HPLC)2,2'-联吡啶-4,4'-二酸 96%Haplosporidium nelsoni
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二磷酸腺苷羟基萘酚蓝二钠盐 ACS1,4-双(二苯膦基)烷 96%Haplosporidium spp.