免费会员 经销商
参考价:
起订量:
具体成交价以合同协议为准
免费会员 经销商
购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | GV3101(pSoup) 感受态细胞 100ul*10 |
包装 | 100ul*10 |
分类 | 根癌农杆菌感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
人卵清蛋白特异性IgE 规格: 48T/96T
人卵巢癌标志物CA125ELISA Kit,48T/96T 人卵巢癌标志物CA125ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96T
PEA 人绿脓杆菌外毒素A 规格: 48T/96T
TrxR 人硫氧还蛋白还原酶 规格: 48T/96T
Trx 人硫氧化还原蛋白 规格: 48T/96T
MS 人硫酸褪黑色素 规格: 48T/96T
KS 人硫酸角质素 规格: 48T/96T
HSPG 人硫酸肝素糖蛋白 规格: 48T/96T
JE IgG 人流行性乙型脑炎抗体IgG 规格: 48T/96T
EP 人流行性腮腺炎 规格: 48T/96T
FLU 人流感病毒抗体IgG 规格: 48T/96T
FLU A 人流感病毒A 规格: 48T/96T
GV3101(pSoup) 感受态细胞 100ul*10 SCCAg 人鳞状细胞癌相关抗原 规格: 48T/96T
SCCAg-2 人鳞状上皮细胞癌抗原2 规格: 48T/96T
PIPLC 人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C 规格: 48T/96T
PLCγ1 人磷酯酶Cγ链 规格: 48T/96T
PLC 人磷酯酶C 规格: 48T/96T
PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM 规格: 48T/96T
GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 规格: 48T/96T
PL-A2 人磷脂酶A2 规格: 48T/96T
PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 规格: 48T/96T
PGM 人磷酸葡萄糖变位酶 规格: 48T/96T
PI3K 人磷酸肌醇3激酶 规格: 48T/96
shēng huà shì jì 硅粒 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 硅胶板HF254 容量: 保存-20℃ 25U
shēng huà shì jì 硅胶板H 容量: 2~8℃ 500毫克
shēng huà shì jì 硅胶板GF254 容量: 保存:-20℃ 10毫克
shēng huà shì jì 硅胶板GF 容量: 保存:-20℃ 10KU
shēng huà shì jì 硅胶板G 容量: 保存:-20℃ 150U
shēng huà shì jì 硅胶HF254 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 硅胶H 容量: 10KU
shēng huà shì jì 硅胶GF254 容量: 1克
shēng huà shì jì 硅胶G 容量: 保存:-20℃ 1克
shēng huà shì jì 硅胶60荧光薄层层析铝箔板 容量: 25毫克
shēng huà shì jì 硅胶60荧光薄层层析玻璃板 容量: 保存-20℃ 5KU
shēng huà shì jì 硅胶60H 容量: 2~8℃ 25毫克
shēng huà shì jì 硅胶60G 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 硅胶60 薄层层析玻璃板 容量: 保存-20℃ 5KU
shēng huà shì jì 硅胶 容量: 5KU
shēng huà shì jì 硅(晶块) 容量: 100克
shēng huà shì jì 光神霉素 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 寡霉素 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 寡聚脱氧胸苷纤维素 容量: 10克
shēng huà shì jì 固紫酱GBC盐 容量: 250ku
shēng huà shì jì 固体改良马丁琼脂培养基 容量: 40克
T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。