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购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | EHA105 感受态细胞 100ul*50 |
包装 | 100ul*50 |
分类 | 根癌农杆菌感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
MIF 人巨噬细胞移动抑制因子 规格: 48T/96T
MIP-5 人巨噬细胞炎性蛋白5 规格: 48T/96T
MIP-3β/ELC 人巨噬细胞炎性蛋白3β 规格: 48T/96T
MIP-3α/CCL20 人巨噬细胞炎性蛋白3α 规格: 48T/96T
MIP-2 人巨噬细胞炎性蛋白2 规格: 48T/96T
MIP-1β/CCL4 人巨噬细胞炎性蛋白1β 规格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 人巨噬细胞炎性蛋白1α 规格: 48T/96T
AmAC-1 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1 规格: 48T/96T
MCF 人巨噬细胞趋化因子 规格: 48T/96T
MDC/CCL22 人巨噬细胞来源的趋化因子 规格: 48T/96T
M-CSFR 人巨噬细胞集落刺激因子受体 规格: 48T/96T
M-CSF 人巨噬细胞集落刺激因子 规格: 48T/96T
MAF 人巨噬细胞活化因子 规格: 48T/96T
MSP 人巨噬细胞刺激蛋白 规格: 48T/96T
Arg 人*酶 规格: 48T/96T
AVP 人*加压素 规格: 48T/96T
MT 人金属硫蛋白 规格: 48T/96T
SE 人金葡菌肠毒素 规格: 48T/96
shēng huà shì j
shēng huà shì jì 草酸锶 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 草酸氢钾 容量: 250克
shēng huà shì jì 草酸镍 容量: 30毫升
shēng huà shì jì 草酸钠 容量: RT 1克
shēng huà shì jì 草酸锂 容量: 2~8℃,避光 250毫克
shēng huà shì jì 草酸钾 容量: 500克
shēng huà shì jì 草酸钴 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 草酸高铁铵 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 草酸钙 容量: RT 100毫克
shēng huà shì jì 草酸二乙酯 容量: 500克
shēng huà shì jì 草酸铵 容量: 25克
shēng huà shì jì 草酸 容量: 25克
shēng huà shì jì 藏红T 容量: 5克
shēng huà shì jì 灿烂甲酚蓝 容量: 2~8°C 25克
shēng huà shì jì 蚕蛹蛋白胨 容量: 保存:-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 布氏肉汤 容量: 25毫升
shēng huà shì jì 布氏琼脂 容量: 2~8℃ 25毫升
shēng huà shì jì 布氏菌选择性培养基 容量: 50张/盒
shēng huà shì jì 布鲁诺广谱高效杀菌剂 容量: 5克
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注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。