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产品名称 | GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞 50ul*50 |
包装 | 50ul*50 |
分类 | 根癌农杆菌感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纤维蛋白抗体 规格: 48T/96T
ANA 人抗核仁抗体 规格: 48T/96T
gp210 人抗核膜糖蛋白210抗体 规格: 48T/96T
ANA 人抗核抗体 规格: 48T/96T
ASA 人抗骨骼肌抗体 规格: 48T/96T
anti-tox IgM 人抗弓形体IgM抗体 规格: 48T/96T
anti-tox IgG 人抗弓形体IgG抗体 规格: 48T/96T
AGAA 人抗高尔基体抗体 规格: 48T/96T
LMA 人抗肝细胞膜抗体 规格: 48T/96T
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞 50ul*50 LC1 人抗肝细胞胞质1型抗体 规格: 48T/96T
LSP 人抗肝特异性脂蛋白抗体 规格: 48T/96T
LSP 人抗肝特异性脂蛋白抗体 规格: 48T/96T
LKM 人抗肝肾微粒体抗体 规格: 48T/96T
CAM-ab 人抗钙调素特异抗体 规格: 48T/96T
AT-DⅣ 人抗钙蛋白酶抑素抗体 规格: 48T/96T
anti-PIV IgM 人抗副流感病毒IgM抗体 规格: 48T/96T
anti-RV IgG 人抗风疹病毒IgG抗体 规格: 48T/96T
ABM-Ab 人抗肺泡基底膜抗体 规格: 48T/96T
MSA 人抗纺锤体抗体 规格: 48T/96T
PM-Scl/PM-1 人抗多发性肌炎硬皮病抗体 规格: 48T/96T
anti-HDV 人抗丁型肝炎病毒抗体 规格: 48T/96T
PR3 Ab-IgG 人抗蛋白酶3抗体IgG 规格: 48T/96T
ssDNA 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体 规格: 48T/96T
AMA 人抗单核细胞抗体 规格: 48T/96T
TRAb 人抗促甲状腺素受体抗体 规格:
shēng huà shì jì 次亚磷酸钙 容量: RT 100克
shēng huà shì jì 次* 容量: 10克
shēng huà shì jì 次氯酸钠 容量: 500克
shēng huà shì jì 次氯酸钙 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 酸铵 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 次甲基绿 容量: 100克
shēng huà shì jì 次铋 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 纯水 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 虫胶 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 赤藓糖醇 容量: 100克
shēng huà shì jì 赤霉素GA4+7 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 赤霉素GA3 容量: 500克
shēng huà shì jì 橙黄IV 容量: 2~8°C 100克
shēng huà shì jì 橙黄G6 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 橙黄Ⅱ 容量: 2~8°C 250克
shēng huà shì jì 橙黄Ⅰ 容量: 2~8°C 250克
shēng huà shì jì 成套缓冲剂 容量: 保存:-20℃ 50次/300ul/支
shēng huà shì jì 称量纸 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 潮霉素B 容量: RT 25克
48T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
GV3101(pJlC SA-rep)电击感受态细胞 50ul*50 |