荧光显微成像技术是开展微观生命科学研究的重要手段和工具,使用该技术可以观察生物体内的精细结构、动态追踪生物体内组织、细胞、细胞核、蛋白、小分子等不同尺度的生命活动过程。
荧光显微镜是一种利用观察物体的荧光来进行产品研究的显微镜设备。它被使用在了许多不同的领域,如生物科学、航天科技、教育机构等。
普通光学显微镜是通过普通光源的照明观察样品标本。而荧光显微镜是利用较短波长的光(激发光)照射样品,使样品受到高能量激发,产生较长波长的荧光(发射光),用来观察和分辨样品中产生荧光的物质成分和位置。
荧光显微镜一般可分为透射式荧光显微镜及落射式荧光显微镜。
透射式显微镜的主要部件为汞灯光源、激发滤色镜、暗场聚光镜(来自下面光源的光线经过暗聚光镜,形成了横过显微镜视野而不进入物镜的强烈光束,因此视野是暗的)、吸收滤色镜。将光源通过聚光镜穿过样品来激发荧光。在一些比较昏暗的环境下适合使用这款显微镜。透射式荧光显微镜的优点是可以产生比较强的荧光,可以很大程度上捕捉到物体的荧光。
透射式荧光显微镜原理图
落射式荧光显微镜主要部件为汞灯光源、激光滤色镜、分色镜(反射激发光,透过荧光)、吸收滤色镜。它的特点是激发光从物镜向下落射到样品标本表面,即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。
落射荧光显微镜原理图
通过荧光显微镜所看到的荧光图像的形态学特征和荧光的颜色、亮度等来判断、记录图像。
荧光显微镜中的一个重要部件为压电扫描台(也称为压电纳米运动台),它可在纵向和水平方向提供几百微米范围的一至三维的运动,可进行样品的聚焦调节,同时也可以进行水平视野范围的调节。
芯明天P12三维压电扫描台应用于荧光显微成像
压电扫描台具有非常高的分辨率,可高达几纳米,非常适于进行纳米级步进位置调节,既可调节样品(或物镜)的Z向升降聚焦,又可调节样品XY向的范围调节。
P12系列压电扫描台技术参数如下:
· 型号:P12.XYZ100S/K
· 运动自由度:XYZ
· 行程范围:0~110µm
· 通孔直径:Ø25或Ø35mm
· 闭/开环分辨率:7/4nm
· 承载能力:0.6kg
· 重量:260g
除压电扫描台外,芯明天公司也提供压电物镜驱动器,如P72系列压电物镜驱动器,它可调节物镜的Z向聚焦运动,步进精度可达几个纳米,且聚焦速度在毫秒甚至亚毫秒量级。
P72系列压电物镜驱动器技术参数如下:
· 型号:P72.Z100S/K
· 运动自由度:Z
· 行程范围:0~110µm
· 闭/开环分辨率:5/2.5nm
· 承载能力:0.2kg
· 重量:150g
压电扫描台与压电物镜驱动器的加入,会大幅提高荧光显微镜的聚焦精度及位置调节精度,并且加快了聚焦与调节的速度。
具有高分辨率的荧光显微镜一般可用于对细胞结构或组分的研究、药物筛选等。