品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
产品名称:蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤
英文名字:Protease Inhibitor Cocktail
背景知识
内源蛋白的产生和降解一般都维持在一个平衡状态,因此在稳定的环境因素下细胞内的蛋白含量是也是稳定的。但是在体外研究中,蛋白合成过程终止,而降解大大增强,从而影响蛋白得率。因此我们建议使用多种小分子组成的抑制剂混合物来抑制蛋白酶的功能,阻止蛋白降解情况的发生。
实验方法
应用领域
蛋白纯化,蛋白免疫印迹, 免疫(共)沉淀,蛋白质pull-down实验,免疫荧光,免疫组织化学,激酶测定等。
使用方法
在室温下溶解DMSO储液, 在您的实验体系中,按照1:100的比率(体积比体积)将抑制剂cocktail加入到样品溶液中(比如细胞裂解液或者组织抽提物)。
蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤常见问题:
问题1: 为什么要用蛋白酶抑制剂Cocktail?
回答1: 蛋白酶抑制剂Cocktail是低毒,全面的蛋白保护试剂,Z大限度地保护蛋白,使其免于被蛋白酶降解。目前生物学研究日渐深入,更多地将目标锁定为细胞中较为微量的蛋白,如信号通路蛋白、受体蛋白,采用coIP,Pull-down等方法获得样品。对于这些微量的珍贵样品,Cocktail能取得的保护效果,比单一的抑制剂(如PMSF)更为可靠。
问题2: 蛋白酶抑制剂Cocktail能否稀释使用?
回答2: 蛋白酶活性抑制效果和很多因素有关,如目标蛋白降解的难易程度、蛋白酶的浓度、活性、抑制剂的浓度都会影响Z后的保护效果。我们的蛋白酶抑制剂Cocktail采用经典浓度配比,确保对不同类型的蛋白酶都有充分的抑制效果。为了取得的保护效果,使用时应按照规定比例稀释,这是此类产品的共性。但实际产品里,不同厂商的标示清楚程度不同,有些友商的对稀释操作描述不严谨,很容易产生可以稀释使用的误导,需要仔细辨读,以免影响实验结果。在部分实验室实际应用中,也存在对于已知蛋白的成熟操作流程中减量使用cocktail的情况,对于这类应用,Biotool可对照同类产品的相同比例稀释使用,可以保证保护效果。
问题3: 实验中经常用PMSF来保护蛋白,蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势?
回答3: PMSF是经典的丝氨酸蛋白酶抑制剂,以前被广泛应用于细胞裂解纯化蛋白过程。但由于PMSF在很多方面存在明显的缺点,逐步被保护效果更好,更安全的蛋白酶抑制剂Cocktail所取代。PMSF的毒性较高,因此在蛋白酶抑制剂中选用AEBSF作为其替代品。AEBSF的半致死量是2834mg/kg,而PMSF是200mg/kg,AEBSF安全域值超过PMSF十四倍多,同时有着相当的抑制效果,对于很多丝氨酸蛋白酶的抑制比PMSF更为迅速。PMSF的另一个缺点是易降解失效,它在水溶液中的半衰期是30min,在细胞裂解过程中很容易失效。而蛋白酶抑制剂Cocktail不但保护更加全面,而且效果更加持久。
问题4: 我应该选择哪种类型的蛋白酶抑制剂cocktail, 片剂还是溶液?
回答4: 在选择cocktail产品类型的时候我们需要注意一些细节问题。两种类型的产品都含有添加物。片剂中含有若干种公司的未经公开的医药成分, 而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。在工业生产中,溶液型产品较片剂来说需要的加工步骤少,因而质量好价格低。而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势,片剂能够在4度储存而不需要零下20度。我们推荐使用溶液型产品,价格更低,有效的抑制剂成分含量更高,便于直接分装。
问题5: DMSO会不会对我的实验造成影响?
回答5: DMSO会影响实验结果的可能性很低。在生物科学领域DMSO被作为很多生物活性物质的溶剂,比如蛋白结晶和免疫共沉淀等要求较高的实验体系中DMSO也有应用。DMSO在室温下性质稳定,在低温条件下DMSO还是优秀的细胞冷冻保护剂。
问题6: 用了Cocktail,结果仍然不好是怎么回事?
回答6: 蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解威胁,提高蛋白得率。对于绝大多数蛋白,Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况,需要谨慎检查实验步骤和方案设计,Z大限度发挥Cocktail作用,减少导致蛋白降解的环节。例如,细胞处理前,先要将裂解体系*准备好,预先加入Cocktail并混匀,将要破碎的细胞,收集完后或从冰箱中取出后立即加入准备好的裂解液中,给予蛋白全程保护。
蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤储存条件:
大部分的试剂产品是比较稳定的,只要您严格按照产品包装或者说明书上的储存条件进行储存,*可以保证其在有效期内的正常使用。一般常见储存条件有零下XX摄氏度,2-8摄氏度,常温等。特别提醒,对于某些酶类制品,如果储存条件是2-8摄氏度,不要储存在零下,否则容易失活,对于某些需要严格避光,防潮,充氮气保护的,接触空气或者过分暴露非常容易氧化或者受潮变质。
低温储存产品,运输途中冷藏问题:
对于需要低温储存的产品,我们在运输时候都会采用冷藏包装,但是部分由于外界气温过高,运输时间较长,对于普通冷藏包装,途中可能会温度升高,这些都是没有问题的,因为这种普通冷藏只适用于那些短期内(2周)高温依然稳定的产品,建议低温的储存条件,只是长期储存时候的条件,您可以放心使用。对于某些特殊的产品,如抗体,我们会采用干冰冷藏包装,确保全程低温。公司都对产品性状进行了严格的加速稳定测试,行业经验丰富。
蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤分装及溶液配制:
您收到货物后不要自己进行分包,因为分包环境、包装材料等因素可能导致分包后的产品变质;如您有特殊包装要求,请在订购时候与我们客服代表阐明,当然价格会做适当调整。对于开盖后,长期未使用的,请务必重新密封好,建议Parafilm封口膜,并按照相应储存条件使用。如果放置时间过长,超过产品有效期,建议您重新购买,以免影响实验质量。
蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤产品应用:
对于一些相对特殊的产品,我们会提供产品说明书,里面会对产品溶解性,及我们所能了解的产品应用信息,实验方案进行描述,您可以作为参考。对于常见试剂,因为应用广泛,一般不提供说明书。如果您在实验过程中遇到了问题,欢迎与我们讨论,我们将尽力帮您解决。
蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤储存条件:避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险 产品可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋!受热、受潮、受光后易丧失活力,保存期短,因此贮存和运输条件比较苛刻。
therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 The PAF receptor binds plaet-activating factor (PAF) and is thought to mediate its action via a G protein that activates a phosphatidylinositol-calcium second messenger system. PAF is a chemotactic phospholipid mediator that possesses potent inflammatory, smooth-muscle contractile and hypotensive activity. It has been implicated as a mediator in diverse pathologic processes, such as allergy, asthma, septic shock, arterial thrombosis, and inflammatory processes.
The PAF receptor is induced by granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), interleukin-5 and n-butyrate. A diverse range of compounds act as PAF receptor antagonists; these may be useful pharmacologically.
英文名称 Anti-p58ipk/DNAJC3
中文名称 干扰素诱导蛋白p58ipk抗体
别 名 DNAJC3; Protein Kinase Inhibitor P58; DnaJ homolog subfamily C member 3; HP58; Interferon induced, double stranded RNA activated protein kinase inhibitor; P58; p58 ipk ; P58IPK; PRKRI; Protein kinase inhibitor of 58 kDa; Protein kinase inhibitor p58.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗
500g 瓶 Yeast Extract 酵母膏
100g 瓶 (YNB)无氨基酸酵母氮源(含硫酸铵)
碱基与核酸
5g 瓶 Alloxan Momohydrate 四氧嘧啶
1g 瓶 6-Benzyl Aminopurine 6-苄基氨基喋呤
5g 瓶 6-Benzyl Aminopurine 6-苄基氨基喋呤
5g 瓶 Adenosine 腺苷
1g 瓶 ATPNa2 三磷酸腺苷二钠
5g 瓶 ATPNa2 三磷酸腺苷二钠
500mg 支 ADPNa2 二磷酸腺苷二钠
1g 瓶 ADPNa2 二磷酸腺苷二钠
1g 瓶 AMPNa2 一磷酸腺苷二钠
5g 瓶 AMPNa2 一磷酸腺苷二钠
蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)操作步骤1vial 支 8-Azaguanine(原装) 8-氮杂鸟嘌呤
5g 瓶 Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸盐
10g 瓶 Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸盐
5g 瓶 Adenine 腺嘌呤
10g 瓶 Adenine 腺嘌呤
25