怎样选择合适的细胞分离试剂盒
从样品中别离提纯同种细胞，是许多下游应用的要害重要的一步，分离得到的细胞能够用于基因判定、细胞计数、生化剖析、蛋白别离、宿主-病原体互作以及细胞间相互作用等研究。一款适宜的细胞分离试剂盒能够说是试验成功的保证，因为只要取得正确的细胞，下游的分析成果才能够更。当前，市面上有多种多样的分离试剂盒可供挑选，它们的首要差异在于分离办法和筛选标志。那么，怎么挑选zui合适自己的细胞分离试剂盒呢？期望这篇文章能为你供给一些帮助。 
正向选择VS负向选择 
细胞分离试剂盒的工作原理
细胞分离试剂盒的工作原理主要有两种，正向选择和负向选择。正向选择的试剂盒，使用与目标细胞直接结合的抗体来进行捕获。这种抗体通常与磁珠相连，能够利用磁铁将悬液中的抗体-磁珠-细胞复合物提取出来，再经过二抗将磁珠与目标细胞分开。负向选择的试剂盒也选用相似的抗体包被磁珠，不过这种试剂盒是经过去掉样品中的非目标细胞，来直接捕获目标细胞。 
这两种细胞分离试剂盒怎么取舍，首先取决于目标细胞的外表是不是具有特异性强的筛选标志。这样的筛选标志能够完成特异性的捕获，防止所取得的细胞被非目标细胞污染。若是你的目标细胞刚好具有这样的筛选标志，那么正向选择的细胞分离试剂盒即是挑选。但如果目标细胞并不具有特异性强的筛选标准，那咱们还是选用负向选择的细胞分离试剂盒。 
筛选标志的断定 
经过PubMed等数据库中的文献，我们通常能够断定在目标细胞上表达的筛选标志。若是文献中找不到合适自己的表面标志，我们还能够用目标细胞的DNA序列进行BLAST查找。BLAST查找结果会显示，目标细胞上能够表达的表面标志，在此基础上能够选择用于捕获的细胞外表蛋白。举例来说，对一个T细胞进行BLAST查找，结果会显示该细胞是不是表达CD4或CD8。在得知目标细胞表达CD4之后，我们能够先对样品进行一个免疫试验（如ELISA），以查验BLAST查找的成果。一旦证明目标细胞确实表达CD4，我们就能够用相应试剂盒来挑选CD4阳性的T细胞。 
一般流程 
关于一个旨在别离CD4阳性T细胞的试剂盒来说，操作流程首要有以下几步。首先，将样品与anti-CD4抗体包被的磁珠一同孵育，使抗体与CD4+ T细胞结合。然后洗去不需要的非目标细胞（即不表达CD4的细胞），留下磁珠-抗体-细胞复合物。将上述复合物与能结合anti-CD4抗体的二抗一同孵育，二抗就会代替CD4+T细胞，形成磁珠-抗体-二抗复合物。我们能可以磁铁去除这种磁珠-抗体-二抗复合物，而所有的CD4+细胞留在上清中。zui后，只需要将上清转移就能可以进行现有研究了。