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简述ELISA试验与操作使用

时间:2018-03-02      阅读:78

ELISA试剂盒可用于测定抗原,也可用于测定抗体,ELISA试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。由于其试剂不乱、易保存,操作简洁,成果断定较客观等要素,已广泛应用在免疫学检修的各领域中。但是,影响ELISA试验成果的要素良多,故加强各个环节的质量确保才干充沛发挥其办法学的利益。ELISA试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验确诊办法。参加酶反响的底物后,底物被酶催化成为有色产品,产品的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。再参加酶符号的抗原或抗体,也经过反响而结合在固相载体上。ELISA的根底是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶符号,此刻固相上的酶量与标本中受检物质的量呈必定的份额。用洗刷的办法使固相载体上构成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分隔。由于酶的催化功率很高,间接地扩大了免疫反响的成果,使测定办法到达很高的敏感度。在测守时,受检标本(测定其间的抗体或抗原)与固相载体外表的抗原或抗体起反响。结合在固相载体外表的抗原或抗体仍坚持其免疫学活性,酶符号的抗原或抗体既留存其免疫学活性,又留存酶的活性。 
ELISA试剂盒操作注意事项:
1. 试剂应按标签阐明书贮存,运用前康复到室温。稀稀往后的规范品应丢掉,不可保存。
2. 试验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,防止蜕变。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前运用。
4. 运用一次性的吸头防止交叉污染,汲取终止液和底物A、B液时,防止运用带金属部分的加样器。
5. 运用洁净的塑料容器装备洗刷液。运用前充沛混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗刷酶标板时应充沛拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反响孔中吸水。
7. 底物A应挥发,防止*打开盖子。底物B对光敏感,防止*露出于光下。防止用手触摸,有毒。试验完成后应立即读取OD值。
8. 参加试剂的次序应共同,以确保一切反响板孔温育的时刻相同。
9. 依照阐明书中标明的时刻、加液的量及次序进行温育操作。

 

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