血清标本越新鲜越好
时间:2017-05-04 阅读:259
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上海机纯告诉科研小伙伴们血清标本越新鲜越好:
1、制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只需待血清天然凝聚、缩短后即可取得。
2、如有细菌污染,菌体中或许富含内源性HRP,也会发生假阳性反应。
3、如在冰箱中保存过久,其间可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。
4、血清标本可按惯例方法搜集,应留心避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本或许会添加非特异性显色。
5、在5天内测定的血清标本可放置于4℃,逾越一星期测定的需低温冰存。
6、冻住血清融解后,蛋白质有些浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上激烈振荡。
7、混浊或有堆积的血清标本应先离心或过滤,弄清后再查看,自配的缓冲液运用pH计测量较正。
8、重复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作屡次查看,宜少数分装冰存。
9、ELISA顶用的蒸馏水或去离子水,包含用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。
可以说在ELSIA试剂盒操作中,洗涤是zui主要的关键技术,因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来,所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大,洗的不*或串了孔,对实验结果将产生很大的影响,所以一定要小心。