ELISA试剂盒在液相色谱中，可供挑选的活动相的规模较宽，且还可组成多元溶剂体系与不同配比，在固定相断定后，活动相的种类、配比、ph值及添加剂等能明显影响别离作用，因此HPLC中活动相的挑选至关重要。
（1）液-固吸附色谱的活动相：在液-固吸附色谱法中，活动相对别离的影响比较明显，操控别离挑选性和别离速度主要靠挑选适合的活动相来完成。一般选用二元以上的混合溶剂体系，在初级性溶剂如烃类中，参加是两极性溶剂如、春蕾等以调理溶剂体系的极性。
（2）ELISA试剂盒化学键合色谱的活动相：可选用固定份额（等度洗脱）或按规则程序改动份额（梯度洗脱）的溶剂组成作为活动相体系，在液-固吸附色谱法中，一般选用二元以上的混合溶剂体系，在初级性溶剂如烃类中，参加是两极性溶剂如、醇类等以调理溶剂体系的极性；在液-液分配色谱法中，活动相极性较小于固定相极性称为正相色谱；活动相极性大于固定相极性称为返现色谱。正相色谱用于别离极性及中等极性的分子型化合物；返现色谱用于别离非极性至中等极性的分子型化合物。在药物剖析中，检讨色谱运用zui广。在反相色谱法中，因为固定相对错极性的，所以，活动相极性越弱，其洗脱才能越强。典型的反相色谱法是用非极性固定相，常用十八烷基键合相（ODS或C18),活动相用甲醇-水或乙腈-水。洗脱时，极性打的组分线流出色谱柱，极性小的组分后流出色谱柱。因为C18键在水相环境中不易坚持扩展状况，故关于反向色谱体系，活动相中有机溶剂的份额一般不低于5%。不然C18键的随机弯曲将导致组分保存值改变，造成色谱体系不稳定。
反向键合相色谱的活动相常选用下列三种：1 部分含水溶剂；以水为根底溶剂，在参加一定量可与水互溶的有机极性调理剂（如甲醇、乙腈、四氢呋喃），适用于别离中等极性、弱极性药物、常用甲醇-水、乙腈-水体系。2 非水溶剂：用于别离疏水性物质，尤其在柱填料外表键合的十八烷基硅胶量较大时，固定相对疏水化合物有反常的保存才能，需求有机溶剂，可在乙腈或甲醇中参加二氯甲烷或四氢呋喃（称非水反相色谱）。3缓冲溶液；适用于可溶于水病可解离的化合物，如蛋白质、多肽及弱酸、弱碱类成分。缓冲液及其PH值不同会影响组分的保存值，常用的缓冲液有三乙胺磷酸盐、磷酸盐、醋酸盐溶液，选用的ph值应运用溶质尽可能成为非解离方式，使固定相有较大保存才能（反向离子按捺色谱）。
争相键合相色谱的活动相一般选用饱满烷烃（如正乙烷）中参加异丙醚等极性较大的溶剂作为极性调理剂，经过调理剂的浓度来改动溶剂强度，常选用二元以上的混合溶剂体系，可用薄层色谱（TLC）探究适合的活动相。
ELISA试剂盒返现离子对色谱的活动相为极性较强的水体系混合溶剂，zui常用的是甲醇-水、乙腈水中参加0.003-0.01mol/L的离子对试剂，调理有机溶剂的份额使组分K值在适合规模。离子对试剂的性质和浓度、活动相的PH值及活动相中有机溶剂的性质和份额都会影响组分的保存值和别离的挑选性。