大鼠CD36ELISA Kit
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大鼠CD36ELISA Kit

48T/96T大鼠CD36ELISA Kit

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-12-23 22:14:07
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上海研生实业有限公司

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产品简介

大鼠CD36ELISA Kit具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点。公司产品品种齐全,质量可靠,拥有完善的售前;售中售后服务体系。

详细介绍

公司提供ELISA Kit为我司主营产品之一,产品皆严格按照相关标准进行,并经过了严格地反复地检测,我们以严谨的态度保证产品的质量,从而保证您的实验顺利进行。产品名称供货周期短,供货及时,且我司还提供完整的售前和售后服务。

产品名称

大鼠CD36ELISA Kit

英文名称

Rat CD36 ELISA Kit

货号

SY-R9639

大鼠CD36ELISA Kit Rat CD36 ELISA Kit

【实验用途】CD36属一种多功能细胞膜受体,直接影响动脉粥样硬化的形成。它于1976年被发现并被归属于一种抗蛋白酶血小板膜表面糖蛋白,并根据它在SDS-PAGE电泳所获分子量而命名为糖蛋白Ⅳ,由于它与白细胞分化抗原CD36相似,因此而得名。CD36是一类分子量为88kDa的细胞表面糖蛋白,广泛在单核细胞、巨噬细胞、内皮层细胞、血小板、红细胞前板、脂肪细胞、肌肉细胞以及内皮层细胞中发现。并且CD36与溶酶体膜结合蛋白(LIMPⅡ)、清道受体B1(SRB1)以及CLA1共同构成一类新的基因家族。CD36蛋白为多肽单链,包含有两个跨膜区域(Transmembrane domains), 且此两区域具有棕榈酰化(Palmitoylated)半胱氨残基。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经生物(biotin)标记。样品和生物标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。


实验前预备:
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线浓度)后,再准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如:10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。

操作流程:
1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2)酶标板置4℃,包被过夜。
3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6)洗板,同(4)。
7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9)洗板,同(4)。
10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

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