大鼠1,25OH2D3 ELISA Kit
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大鼠1,25OH2D3 ELISA Kit

48T/96T大鼠1,25OH2D3 ELISA Kit

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-03-08 15:08:33
780
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上海研生实业有限公司

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产品简介

大鼠1,25OH2D3 ELISA Kit 试剂盒检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。

详细介绍

大鼠1,25OH2D3)ELISA Kit Rat 1,25OH2D3 ELISA Kit

【实验用途】1,25(OH)2D3是维生素D在体内的高度活性形式,皮肤中的7脱氢胆固醇在阳光或紫外光照射下转化成维生素D3,在肝经25羟化酶系和肾脏1α羟化酶羟化作用下形成1,25(OH)2D3,是其在机体内发挥调节作用的基本形式。1,25(OH)2D3是抗炎症活动的天然调节剂,不仅能预防MS的发生,还可降低疾病的活动度,并且适当的血药浓度还可降低并发症(骨折及肌无力等)的发生。1,25-(OH)2D3 是调节体内钙稳定的重要激素,而24,25-(OH)2D3的生理作用很弱。L,25-(OH)2D3的生成受 PTH血液中钙、磷的浓度及本身含量的调节。VD具有促进肠微绒毛上皮细胞合成钙结合蛋白,促进钙的吸收。促进破骨细胞活动并加强甲状旁腺动员骨钙的作用,使血钙和血磷浓度升高。另还有促进肾小管对钙磷的再吸收。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

公司提供ELISA Kit为我司主营产品之一,产品皆严格按照相关标准进行,并经过了严格地反复地检测,我们以严谨的态度保证产品的质量,从而保证您的实验顺利进行。产品名称供货周期短,供货及时,且我司还提供完整的售前和售后服务。

产品名称

大鼠1,25OH2D3)ELISA Kit

英文名称

Rat 1,25OH2D3 ELISA Kit

货号

SY-R9633

实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。

实验前预备:
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线浓度)后,再准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如:10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。

操作流程:
1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
2)酶标板置4℃,包被过夜。
3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

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