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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
产品名称 | 规格 | 货号 |
Primarker™人少突胶质前体细胞鉴定试剂盒价格 | 6次/盒 | YS-X6946 |
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
ZENKER固着 进口/国产 规格:50毫升
PARP蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 进口/国产 规格:25次
细胞总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
钙离子膜通道钠钙交换体(NCX/质膜)功能荧光检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
细胞PARP蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
组织乙醇脱氢酶总活性(NDMA)比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
电镜组织*基吡啶固着(2,4,6-Trimethylpyridine puriss) 进口/国产 规格:50毫升
冰冻切片组织CYP2B1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
人体RUNX3基因重组表达载体(pGEFP-RUNX3)感受态菌DH-5α 进口/国产 规格:1毫升
细胞FYNT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) 进口/国产 规格:20次
冰冻切片组织PAR-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒(无一抗和二抗) 进口/国产 规格:50次
Primarker™人少突胶质前体细胞鉴定试剂盒价格PEA琼脂/PEA Agar从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌250克国产/进口
大鼠肝细胞英文名称:CBRH-7919
L-GlutamineDami(人巨核细胞白血病细胞)
Improved-Lowry蛋白定量试剂盒500次国产
木糖-明胶培养基/Xylose Gelatin Medium用于蜡样芽孢杆菌明胶试验250克国产/进口
异常汉逊酵母 Hansenula anomala酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
猴菌嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
人肺腺细胞英文名称:NCI-H1395
3%钠三糖铁琼脂 规格: 250g 用途: 用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeNCI-N87 [N87]人胃细胞
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。