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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6336 |
商品介绍:
测定意义
CS(EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。
测定原理
CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
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柠檬酸合酶(CS)可见分光光度法检测试剂盒无水碳 99.995% metals basis人麻疹病(MV)抗体(IgM)免疫试剂盒CD163蛋白样1抗体Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 化酯Cγ1抗体
无水碳 ACS, ≥99.0% 人麻疹病(MV)抗体(IgG)免疫试剂盒周期素依赖性激5调节蛋白1样蛋白1抗体Phospho-PLC beta3 (Ser537) 化酯Cβ3抗体
硝 AR,99.0%人落叶型天疱疮抗体(PF-Ab)免疫试剂盒22号染色体开放阅读框31抗体Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 化酯Cβ3抗体
硫 CP,98.5%人络氨(TYR)免疫试剂盒分裂周期37样蛋白1抗体phospho-PLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) 化心脏蛋白抗体
盐脒,水合 98%人轮状病抗原(RV Ag)免疫试剂盒羧肽X(M14家族1)抗体phospho-PLB(Ser16) 化心脏蛋白抗体
4- 99.0%人轮状病(RV)抗体(IgG)免疫试剂盒卷曲螺旋结构域蛋白135抗体Phospho-PKR (Thr451) 化蛋白激R抗体
4- 97%人轮状病(RV)IgM 免疫试剂盒跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体Phospho-PKR (Thr446/451) 化蛋白激R抗体
1-氨茚满 98%人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)免疫试剂盒分子伴侣CESK1蛋白抗体Phospho-PKR (Thr446) 化蛋白激R抗体
水杨 98%人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)免疫试剂盒卷曲螺旋结构域蛋白124抗体phospho-PKMYT1(Thr495) 化髓鞘转录因子1激抗体
1-氨茚满 98%人卵清白蛋白免疫试剂盒CDK5激活结合蛋白1抗体Phospho-PKM2 (Tyr105) 化酮激M2抗体
盐 98%人卵泡抑素样蛋白1(FSTL-1)免疫试剂盒化表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体Phospho-PKC gamma (Thr674) 化蛋白激C亚型G抗体
(R)-(+)-2,2'-双(二膦)-1,1'-联萘 98%人卵泡抑素(FS)免疫试剂盒肿瘤/抗原1B/1APhospho-PKC gamma (Thr514) 化蛋白激C亚型G抗体
(S)-(-)-2,2'-双(二膦)-1,1'-联萘 98%人卵脂免疫试剂盒化分裂周期蛋白25B抗体phospho-PKC delta (Tyr52) 化蛋白激C亚性D型抗体
(±)-2,2'-双-(二膦)-1,1'-联萘 98%人卵脂胆固酰转移(LCAT)免疫试剂盒跨膜蛋白12抗体phospho-PKC delta (Tyr311) 化蛋白激C亚性D型抗体
(R)-(-)-1,1'-联-2-萘酚二(三氟磺酯) 98%人卵巢癌抗原X1(OVX1)免疫试剂盒免疫球蛋白超家族成员16抗体phospho-PKC delta (Thr505) 化蛋白激C亚性D型抗体