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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6337 |
商品介绍
测定意义 PDC主要存在于酵母中,是乙醇发酵的关键酶之一,催化丙酮酸脱羧生成乙醛。 测定原理: PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛,添加乙醇脱氢酶(ADH)来进一步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+没有;通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算PDC活性。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC 荧光素标记抗化信号转导与转录激活因子1抗体IgG
Anti-phospho-STAT3(pThr705)/FITC 荧光素标记抗化信号转导和转录激活因子3抗体IgG
Anti-JNK2/FITC 荧光素标记末端激2抗体IgG
Anti-phospho-STAT5a(pThr694)/FITC 荧光素标记抗化信号转导和转录激活因子5a抗体IgG
Anti-JNK3/MAPK10/FITC 荧光素标记末端激3抗体IgG
Anti-phospho-STAT6(pThr641)/FITC 荧光素标记抗化信号转导和转录激活因子6抗体IgG
Anti-phospho-Src(pTyr529)/FITC 荧光素标记抗化Src原癌基因抗体IgG
Anti-phospho c-Raf/RAF1(pSer338/pTyr340)/FITC 荧光素标记抗化原癌基因c-raf抗体IgG
丙酮酸脱羧酶(PDC)微量法检测试剂盒帕莫 97%人血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)免疫试剂盒α1-chimaerin蛋白抗体Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗牛IgG
3-双(2-羟乙)氨-2-羟磺 98%人血小板型果糖激(PFKP)免疫试剂盒信号转导蛋白9复合体7b抗体Rabbit Anti-Bov IgG 兔抗牛IgG
5,5'二硫代双(2-) 98%人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)免疫试剂盒钙调神经调节蛋白1抗体(唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白1)Rabbit Anti-Biotin/RBITC 罗丹明标记的兔抗抗体IgG
N-乙-N-(2-羟-3-磺)-3-氧钠盐 99%人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)免疫试剂盒钙调神经调节蛋白3抗体(唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白3)Rabbit Anti-Biotin/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗抗体IgG
2-乙磺钠 98%人血小板生成素自身抗体(IgG)免疫试剂盒Centaurin α1抗体Rabbit Anti-Biotin/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗抗体IgG
N-三(羟)氨-2-羟磺 99%人血小板生成素受体(C-MPL)自身抗体IgG 免疫试剂盒B淋巴白血病/淋巴瘤11/锌指蛋白856抗体Rabbit Anti-Biotin/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗抗体IgG
N-(3-磺)-3,3',5,5'-四联钠盐 99%人血小板生成素(TPO)免疫试剂盒B淋巴白血病/淋巴瘤11B抗体Rabbit Anti-Biotin/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗抗体IgG
长春质碱 分析标准品,≥98%人血小板生长因子(PGF)免疫试剂盒钙平衡调节蛋白1抗体Rabbit Anti-Biotin/PE PE标记的兔抗抗体IgG
三氧化钼 99.95%人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)免疫试剂盒阿尔茨海默病淀粉样蛋白相关胶原蛋白抗体Rabbit Anti-Biotin/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗抗体IgG
三氧化钼 99.95%,100nm人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫试剂盒老年痴呆相关类钙粘蛋白CS1抗体Rabbit Anti-Biotin/Gold 胶体金标记的兔抗抗体IgG
二硫化钼 AR,99%人血小板激活因子乙酰水解2,质(PAFAH2)免疫试剂盒凋亡诱导蛋白NALP3抗体Rabbit Anti-Biotin/FITC FITC标记的兔抗抗体IgG
钼粉 99.5% metals basis,2μm人血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒猪圆环病Ⅱ型衣壳蛋白抗体Rabbit Anti-Biotin/Cy7 Cy7标记的兔抗抗体IgG
砷 99.995% metals basis人血小板反应蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)免疫试剂盒血管激活钙启动受体蛋白1抗体Rabbit Anti-Biotin/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗抗体IgG
砷标准溶液 浓度范围:0.444(mg/L) ±0.028mg/L人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)免疫试剂盒干生长因子受体/表面分化抗原抗体Rabbit Anti-Biotin/Cy5 Cy5标记的兔抗抗体IgG
对氨胂 98%人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)免疫试剂盒离子通道蛋白6抗体Rabbit Anti-Biotin/Cy3 Cy3标记的兔抗抗体IgG
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。