丙酮酸脱羧酶（PDC）紫外分光光度法-上海谷研实业有限公司手机版

详细介绍

商品属性：

产品名称	丙酮酸脱羧酶（PDC）紫外分光光度法
规格	50管/48样
检测方法	紫外分光光度法
货号	GOY-01S6338

商品介绍：

测定意义

PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。

测定原理：

PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340 nm有吸收峰，而NAD+没有；通过测定340 nm光吸收下降速率，来计算PDC活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。

实验方法学：

一、肝素的配制：

市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集：

全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2-溴-3-十二烷基噻吩 95%2,6-二氯苯肼盐酸盐 98%Anti-CK18/FITC 荧光素标记角蛋白18抗体IgG

三苯基膦醋酸钯 Pd 14.2%2,6-二氟吡-3-酸 95%Anti-CK19/FITC 荧光素标记角蛋白19抗体IgG

1,4-双(二苯基膦丁烷)二氯化钯 98%3,4-二氯苯肼盐酸盐 97%Anti-CK19/Gold 胶体金离子标记角蛋白19抗体IgG

双(乙)氯化钯(II) Pd 41.0%2-氟苯肼盐酸盐 97%Anti-CK19/FITC 荧光素标记角蛋白19抗体IgG

双(二苯基膦) 98%3-氟苯肼盐酸盐 97%Anti-CK19/RBITC 红色荧光素罗丹明标记角蛋白19抗体IgG

1,2-双(二苯基膦)乙烷 98%6-氟吡-3-酸 96%Anti-CK20/FITC 荧光素标记角蛋白20抗体IgG

1,5-双(二苯基膦)戊烷 97%2-氟吡-3-酸 97%Anti-CK34 BetaE12/FITC 荧光素标记高分子量角蛋白CK34βE12抗体IgG

1,6-双(二苯基膦基)己烷 97%2-羟基-5-氟吡 97%Anti-CK-HMW/FITC 荧光素标记高分子量角蛋白抗体IgG

丙酮酸脱羧酶（PDC）紫外分光光度法D-3-氨 98%CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 表面趋化因子受体4抗原猴组织蛋白B(CTSB)联免疫吸附测定试剂盒

L-2-氨 97%CCR-6/CD196 peptide 表面趋化因子受体6抗原猴胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺钕 98%CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide 表面趋化因子受体6抗原猴重去素(NEB)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺镍(II) 96%CCR-7(CC chemokine receptor 7) CC趋化因子受体7（多肽）猴Apelin蛋白(APLN)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺镨 98%CXCL10/IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗原猴B分化因子(BCDF)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺 98%VEGF(Vascular endothelial growth factor) 血管内皮生长因子（多肽抗原）猴Bcl2关联永生因3(BAG3)联免疫吸附测定试剂盒

DL-4-溴氨 99%CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase) CD10抗原猴原钙黏素1(PCDH1)联免疫吸附测定试剂盒

BOC-D-炔甘氨 95%ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1) ZCWCC1抗原猴谷氨脱羧(GAD)联免疫吸附测定试剂盒

BOC-D-3-(2-吡)-氨 99%CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原猴间隙连接蛋白31(CX31)联免疫吸附测定试剂盒

FMOC-D-4-溴氨 95%CD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原猴色素P450家族成员7A1(CYP7A1)联免疫吸附测定试剂盒

L-烯甘氨 95%CD146/MCAM 黑色素瘤粘附分子CD146抗原猴蛋白17(Sp17)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺钠 98%ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽N抗原猴半糖6硫酯(Gal-6S)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺银(Ⅰ) 97%CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/内素受体抗原猴胱天蛋白12(Casp12)联免疫吸附测定试剂盒

三氟磺钐 98%CD28 CD28抗原猴GATA结合蛋白3(GATA3)联免疫吸附测定试剂盒

三银 98%CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白粘附分子抗原猴血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)联免疫吸附测定试剂盒

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。

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