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根据中华人民共和国*部GA/T842-2009行业标准及2011年5月1日起施行的新刑法规定血液中酒精含量达到80mg/100ml以上即为醉酒驾车,我公司按照2011年5月1日起施行的新刑法规定研发推出的型GC2020顶空-气相色谱仪(血液中酒精检测仪)
顶空进样器与气相色谱仪工作原理及优点:
启动后按设定值自动完成加热样品;进针;充压平衡;取样;样品充入定量管;六通阀切换进样;启动工作站开始采样记录等工作.
分析是通过样品基质上方的气体成分来测定这些组分在原样品中的含量.显然,这是一种间接分析方法,其基本理论依据是在一定条件下气相和凝聚相(液相和固相)之间存在着分配平衡.所以,气相的组成能反映凝聚相的组成.我们可以把顶空分析看成是一种气相萃取方法,即用气体作“溶剂”来萃取样品中的挥发性成分,因而,顶空分析就是一种理想的样品净化方法.传统的液液萃取以及SPE都是将样品溶在液体中,不可避免地会有一些共萃取物干扰分析.况且溶剂本身的纯度也是一个问题,这在痕量分析中尤为重要.而气体作溶剂就可避免不必要的干扰,因为高纯度气体很容易得到,且成本较低,这也是顶空GC被广泛采用的一个重要原因.
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1 材料和方法
1.1 主要仪器 滕州中科谱GC2020型气相色谱仪,DK-16型半自动顶空进样器,N2000色谱工作站。
1.2 试剂 空白抗凝血,无水乙醇(色谱纯),叔丁醇(色谱纯,内标物)。
1.3 试剂配置
1.3.1 乙醇标准储备液、叔丁醇标准储备液 用移液器分别准确吸取无水乙醇1.26 ml(相对密度0.7893)、叔丁醇1.24 ml(相对密度0.803 7)于100 ml容量瓶中,用重蒸水稀释至刻度,混匀,分别得浓度为10 g/L的乙醇标准储备液、叔丁醇标准储备液。置4℃冰箱保存(可保存1年)
1.3.2 乙醇标准工作液、叔丁醇标准工作液 分别吸取一定量的乙醇标准储备液和叔丁醇标准储备液,用蒸馏水稀释10倍,分别得浓度为1 g/L的乙醇标准工作液和叔丁醇标准工作液
1.4 色谱条件和顶空条件 色谱柱 毛细管色谱柱,柱温80℃,检测室温度220℃,进样温度200℃. 顶空样品温度80℃,阀体温度90℃,样品管路温度90℃。
1.5 样品制备 精确吸取2份待测全血0.5 ml,分别加入样品瓶中,加100 μl(1 g/L)叔丁醇标准工作液作为内标,用密封钳加封铝帽,密封好瓶塞,混匀,放入DK-300顶空进样器加热位里面。
另取空白全血2份,根据待测血液中乙醇含量的多少(目测乙醇峰面积的大小),添加相应的乙醇标准工作液(20 μg~2 mg),内标液按上述方法平行操作,作为已知对照。
1.6样品检测 按下顶空进样按键,仪器自动负压吸取样品进气相色谱分析,同时顶空进样器给色谱工作一个采样信号,色谱工作站开始记录色谱数据。每个试样进样2次。
1.7 标准曲线的制作 将10 g/L的乙醇标准储备液用重蒸水分别稀释10、100、1000倍,得浓度分别为1、0.1、0.01 g/L的乙醇标准液,然后分别取0.05、0.1、0.2、0.4 ml的1 g/L乙醇标准液,0.1、0.2 ml的0.1 g/L乙醇标准液,0.1、0.2 ml的0.01 g/L乙醇标准液,同时加入0.2 ml的1 g/L叔丁醇标准工作液做内标,检测后制作标准工作曲线。见表1。
1.8记录与计算 记录检材及已知对照中乙醇及内标峰面积值,填入GC定量分析记录表中,并计算出各检材中乙醇及内标的平均峰面积。表1 标准工作曲线相关数据 乙醇添加量理论计算的乙醇浓度根据表1的数据,计算标准曲线的回归方程及相关系数:
y=1.4062x+0.0268,r=0.999
计算检材中醇含量W(g/100 ml)
W=f×检材中的醇峰面积平均值×内标添加量(μg)×100检材中内标峰面积平均值×检材量×1000
f=空白检材中醇添加量×内标峰面积平均值空白检材中内标添加量×醇峰面积平均值
计算相对相差(用来检验平行操作的稳定性及数据的可靠性):
相对相差(%)=|W1-W2|W×100
式中W1、W2为2份检材平行定量测定的结果,W为2份检材平均值。
2结 果
2.1测定的色谱图 见图1、2。
该条件下目标峰与内标分离*,(3.39±0.5)min处为乙醇目标峰,(10.0±0.5)min处为内标峰。
2.2 线性关系 在确定的*试验条件下,对不同浓度的乙醇标准工作液进行测定,其回归方程为y=1.4062x+0.0268,r=0.999。在乙醇浓度为0.01~10.0 g/L范围内,血液中乙醇含量与相应的峰面积值呈良好的线性关系,测定限为0.01 g/L。
如有需要测定血液中乙醇含量可
滕州中科谱分析仪器有限公司
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