胶体金测试真菌毒素原理及优点
时间:2024-09-30 阅读:150
胶体金的特性基础
胶体金是由氯金酸 (HAuCl₄) 在还原剂作用下,聚合成一定大小的金颗粒,由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金颗粒具有高电子密度的特性,在显微镜下可见黑褐色颗粒。
它能与生物大分子(如蛋白质等)结合,且结合后不会影响生物大分子的生物活性。
免疫反应原理
当样品中存在真菌毒素时,真菌毒素会与胶体金 - 抗体复合物中的抗体竞争结合检测线上的捕获试剂。由于样品中的真菌毒素与抗体的亲和力,会导致胶体金 - 抗体复合物不能有效地被检测线上的捕获试剂捕获,从而使检测线颜色变浅或者不显色,这表示阳性结果。
同时,在质控线(通常是固定抗抗体或其他质控试剂的区域),无论样品中是否有真菌毒素,胶体金 - 抗体复合物中的抗体或者剩余的胶体金 - 抗体复合物会与质控线上的试剂结合,显示出颜色,以表明试纸条检测过程正常。
抗原 - 抗体特异性结合:在胶体金检测真菌毒素的体系中,首先会有针对真菌毒素的特异性抗体。真菌毒素作为抗原,当样品中含有真菌毒素时,毒素(抗原)会与抗体发生特异性结合。
胶体金标记物的作用:将胶体金与特异性抗体结合形成胶体金 - 抗体复合物。在检测时,如果样品中没有真菌毒素,胶体金 - 抗体复合物可以在检测区域(如试纸条的检测线)正常移动并被捕获试剂(如固定在检测线上的抗抗体或抗原类似物)捕获,显示出特定的颜色(如红色),表示阴性结果。
竞争反应机制(以免疫层析试纸条为例)
同时,在质控线(通常是固定抗抗体或其他质控试剂的区域),无论样品中是否有真菌毒素,胶体金 - 抗体复合物中的抗体或者剩余的胶体金 - 抗体复合物会与质控线上的试剂结合,显示出颜色,以表明试纸条检测过程正常
当样品中存在真菌毒素时,真菌毒素会与胶体金 - 抗体复合物中的抗体竞争结合检测线上的捕获试剂。由于样品中的真菌毒素与抗体 的亲 和力,会导致胶体金 - 抗体复合物不能有效地被检测线上的捕获试剂捕获,从而使检测线颜色变浅或者不显色,这表示阳性结果
胶体金法的优点
操作简便
胶体金免疫层析法不需要复杂的仪器设备,对操作人员的专业要求相对较低。例如,检测过程可能仅需将样品滴加到试纸条上,在数分钟到数十分钟内即可观察结果,无需特殊培训就能进行操作。
快速检测
能够在较短时间内得到检测结果。一般来说,从加样开始到得出结果,整个过程可以在 10 - 30 分钟内完成,这对于现场快速筛查、即时诊断等场景非常适用,如在农产品收购现场快速检测真菌毒素等有害物质。
成本较低
胶体金免疫层析法的试剂制备相对简单,不需要昂贵的仪器设备进行检测,试纸条等检测材料的生产成本也相对较低。这使得该方法在大规模筛查、基层检测单位以及一些经济欠发达地区的应用中具有成本优势。
稳定性好
胶体金标记物具有较好的稳定性,可以在常温下保存一定时间。例如,部分胶体金免疫层析试纸条在常温下能够保存数月甚至一年以上,并且仍能保持较好的检测性能,减少了对冷链等特殊保存条件的依赖。
直观结果
检测结果以试纸条上的颜色变化来显示,直观易懂。例如,在检测线上出现特定颜色条带表示阴性结果,颜色条带缺失或变浅表示阳性结果,即使是非专业人员也能够较为容易地判断结果。
特异性强
基于抗原 - 抗体特异性结合的原理,对目标物质具有高度特异性。只要抗体的特异性良好,就能够准确地识别目标真菌毒素、病原体或其他生物标志物等,减少假阳性和假阴性结果的出现。