对象与方法

*（GnRH-ant，Merck，德国），人绝经期尿*（human menopausal gonadotropin，HMG，丽珠医药集团股份有限公司），人绒毛膜*（human chorionic gonadotropin，HCG，丽珠医药集团股份有限公司）。胞内染色试剂盒（BioLegend，美国），Annexin Ⅴ染色试剂盒 [ 赛默飞世尔科技（中国）有限公司 ]。5- 溴脱氧*核苷（5-bromodexyuirdine，BrdU，Sigma，美国），Ⅳ型胶原酶（Sigma，美国）。摇床（海门市其林贝尔仪器制造有限公司），低温离心机（Eppendorf，德国），流式细胞仪（BD，美国）。使用眼科剪将收集的小鼠子宫碎至约 1 mm3 碎块，经Ⅳ型胶原酶消化后加入含 5% 胎牛血清培养液终止消化。

结果

以 CD45、CD3 和 NK1.1 标记小鼠 uNK 细胞后，采用荧光标记的磷脂结合蛋白 Annexin Ⅴ染色，并用流式细胞术检测 GnRH-ant 对 uNK 细胞凋亡的影响。结果显示，与对照组相比，GnRH-ant 组小鼠 uNK 细胞凋亡水平下降（P=0.004）。Pf 和 Gz-B 是 NK 细胞发挥毒性作用的主要细胞因子，本研究对小鼠 uNK 细胞内的这 2 个因子的表达水平进行分析，结果显示，与对照组相比，GnRH-ant组小鼠 uNK 细胞内 Pf（P=0.000）和 Gz-B（P=0.034）的表达水平均较高。近年来，GnRH-ant 方案凭借其简便、灵活、安全、有效等优势在辅助生殖领域得到了广泛应用，但 GnRH-ant对内膜容受性的不利影响使得该方案的胚胎种植率及临床妊娠率偏低 。与自然周期方案组相比，GnRH-ant 方案组子宫内膜中多种与细胞黏附、信号转导及 T 细胞受体信号通路相关的基因表达发生了显著变化

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