在 SpectraMax i3x 读板机上检测氧化代谢和糖酵解活性
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166次为了生存,细胞需要 ATP 形式来提供能量维持正常生理活性。这种形式的能量是通过糖酵解和线粒体呼吸过程产生的。当两者都产生 ATP 时,糖酵解在缺乏氧气的情况下可以发挥作用,而线粒体在氧化磷酸化 (OXPHOS) 的最后一步需要氧气参与产生 ATP。这些途径在适应环境压力、底物可用性和缺氧的同时,动态地转变以满足细胞的能量需求。一般而言,测量其动态的变化提供了比单点测量 ( 例如 ATP 终点法 ) 更多的关于代谢反应的信息。呼吸作用受到抑制是药物毒性后线粒体功能紊乱的重要、敏感指标。线粒体功能的异常与越来越多的疾病有关,从神经退行性病变到癌症。
了解这些途径是如何应对效应化合物作出何种反应,可以为了解细胞的整体功能和决定细胞命运的潜在机制提供有用的见解。
新型检测试剂盒的出现和更多功能微孔板读板机的问世,为实现基于微孔板形式的代谢分析提供了有效的手段。这里,我们描述了在 SpectraMax® i3x 微孔读板机上使用 Agilent MitoXpress® Xtra 耗氧量分析和 Agilent pH-Xtra™ 糖酵解分析。