基于 BCA 法的蛋白质定量-SpectraMax iD5
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87次BCA 法是一种通过比色分析来对蛋白质进行定量的方法。该方法利用蛋白在碱性环境中将 Cu2+ 还原成 Cu+,BCA 与 Cu+ 形成有颜色的络合物。该水溶液络合物在特定波长下有强烈的吸光值,且在一定范围内蛋白浓度与光吸收值成正比,这就使得我们可以利用微孔板读板机进行高通量、高灵敏度的蛋白定量检测。早期的 PierceTMBCA 蛋白检测试剂盒需要 37℃ 孵育 30 分钟,在 562 nm 处检测光吸收变化。
新版Pierce Rapid Gold BCA 蛋白检测试剂盒仅需室温孵育 5 分钟就会产生强烈的橙-金络合物,在 480 nm 处检测。SpectraMax iD5 多功能微孔板读板机具有光吸收检测功能,可以进行蛋白定量
检 测 。 下 面 , 我 们 介 绍 一 下 如 何 用SpectraMax iD5 配套 SoftMax®Pro 软件,用 Pierce BCA 蛋白检测试剂盒和 PierceRapid Gold BCA 蛋白检测试剂盒进行检测。以上试剂盒均包括标准品牛血清白蛋白,SoftMax Pro 预设的模板可以根据标准曲线将待测蛋白的浓度自动计算出来。Pierce Rapid Gold BCA 蛋白检测试剂盒仅需室温孵育 5 分钟相比 Pierce BCA 试剂盒 37℃ 孵育 30 分钟,可节省大量时间且提高操作简便性。