使用 FlexStation 3 微孔读板机检测双荧光素酶表达
时间:2021-07-06 阅读:180
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美谷分子仪器(上海)有限公司 -
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180次报告基因是研究细胞通路激活相关基因表达的重要工具。细胞转染含有报告基因和感兴趣基因序列的质粒,通常是启动子或其他转录控制元件。当启动子激活时,报告基因表达且可测定其表达水平。
萤火虫荧光素酶是普遍使用的报告基因。其发光信号所提供的灵敏度相比荧光和其他方法更优。第二种发光报告基因是海肾荧光素酶,通常作为组成型启动子的对照,用以标准化诸如转染效率和细胞数量等差异。由于萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶使用不同的底物,所以两者可在同一个孔中使用双荧光素酶实验进行检测。
SpectraMax® DuoLuc Reporter Assay 试剂盒可实现在微孔板中使用萤火虫和海肾荧光素酶进行高灵敏度定量实验。添加萤火虫工作液到样品孔可启动萤火虫发光反应,然后在加入海肾工作液可淬灭萤火虫荧光素酶反应同时启动海肾荧光素酶发光反应。