制备液相色谱仪进行时，保留时间变化了该怎么办
时间：2022-04-25 阅读：96
制备液相色谱仪基本步骤。
一、开机
1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中)
2、开仪器电源开关，一般先上后下，下为检测器开关。
3、检查流动相是否够，仪器上记录的溶剂量时候正确。
4、开电脑
5、打开仪器联机软件进入界面，点击启动设置泵流速为10，此时仪器中应该有液体流出
6、点击平衡然后点击每个波长和调整
冲一段时间，待压力稳定后可以进样
二、进样
1、将进样器扭到load朝上，吸取一定量待分离液，快速注入，做过的是吸取0.2毫升。
2、点击控制界面菜单栏中“运行控制”按钮—样品信息—设置信息存储路径(每次都要做)
3、扭动进样器，使处于inload状态，保留时间开始计时
4、接峰
5、所有峰出来后，点击菜单栏中的中断—中断，准备重复进样
三、关机
1、点击中断后冲几分钟，将流速设为0，待压力为0后将吸头转移到甲醇中，并把流速设为10
2、冲到已经没有东西被冲下为止，一般需要半个小时。一般此时压力早已稳定。
3、将流速设为0，点击界面上的关闭(在启动旁边)
4、关闭窗口，弹出的窗口都点肯定的，如确定是等
7、关闭仪器和电脑
6、关闭插板
制备液相色谱仪故障主要有以下一些：
(一)保留时间变化
1.柱温变化：柱恒温，必要时需配置恒温箱
2.等度与梯度间未能充分平衡：至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
3.缓冲液容量不够：用》25mmol/L的缓冲液
4.柱污染：每天冲洗柱
5.柱内条件变化：稳定进样条件,调节流动相
6.柱快达到寿命：采用保护柱
(二)保留时间缩短
1.流速增加：检查泵,重新设定流速
2.样品超载：降低样品量
3.键合相流失：流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向
4.流动相组成变化：防止流动相蒸发或沉淀
5.温度增加：柱恒温