制备液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。

 

　　一般柱长在2—250mm，柱越长，分离度越高，但柱压更高，分离所需时间更长;但分离度与理论塔板数的平方根成正比，所以一昧增加柱长并不是zui有效的分离手段，一般情况下，150mm、5um的填料可以提供足够的塔板数。

 

　　正相色谱n流动相极性小于固定相极性的分配色谱法称为正相分配色谱。常用的分析柱有：n氨基柱、氰基柱、硅胶柱。n常用流动相为极性小的有机溶剂。反相色谱n流动相极性大于固定相极性的分配色谱法称为反相分配色谱法。常用的分析柱有：ODS(C18)，C8，C2。n常用流动相为甲醇-水，乙腈-水。

 

　　空间排斥色谱n也称凝胶色谱，依据被分离组分分子尺寸与凝胶空径大小之间的相对关系而分离，类似于分子筛作用。在一定分子线团尺寸内，分子越大，保留时间越短。凝胶渗透——以有机溶剂为流动相凝胶过滤——以水溶液为流动相对于相同化学组成的高分子化合物，其分子尺寸大小与分子量成正比，因此凝胶色谱可以研究高分子化合物的分子量分布。

 

　　制备液相色谱时，配制流动相应用新鲜水，水质要求越高放置时间越短。理想的HPLC用水应为0.055μS/cm的超纯水，并通过0.22μm的滤膜，除去热源、有机物、无机离子及空气等。