其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
产品名称 | 5637 (人膀胱癌细胞) | 货号 | A01X627 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名称 | 5637:5637 |
分类 | 人细胞系 | 用途 | 仅供科研实验 |
商品介绍:
鉴定 | (STR鉴定正确) |
种属 | 人 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 |
培养方案A(默认) | 生长培养基: RPMI-1640+10% FBS+1% P/S培养条件: 气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃ |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
注意事项 | 该细胞较难消化,注意延长消化时间,消化到细胞收缩变圆,轻拍培养瓶侧边,细胞可以滑落方可终止消化。 |
背景描述 | 5637细胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 |
年龄(性别) | 男性;68岁 |
组织来源 | 膀胱;癌 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 膀胱癌细胞 |
生物安全等级 | BSL-1 |
倍增时间 | ~24-36 hours |
致瘤性 | Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
保藏机构 | ATCC; HTB-9 DSMZ; ACC-35 |
细胞冻存注意事项:
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候,这时细胞生长状态好,细胞数量也多,并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样,用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬,活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml ),加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀,分装到冻存管,冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中, 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中, DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ,某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍,再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说,每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时,再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间,细胞可保存在气态层或浸入液氮中,如果可能最好保存在气态层,因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮,需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
操作步骤:
(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。
公司正在出售的产品:
CFPAC-1人胰腺癌细胞 | One-Step Firefly Luciferase Assay Kit(一步法萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒) |
CoC1人卵巢癌细胞 | D-Luciferin, Potassium Salt(D-萤光素钾盐) |
COLO205人结肠癌细胞 | D-Luciferin, Potassium Salt(D-萤光素钾盐) |
COLO320人结直肠腺癌细胞 | D-Luciferin, Sodium Salt(D-萤光素钠盐) |
COLO320 DM 人结直肠腺癌细胞 | D-Luciferin, Sodium Salt(D-萤光素钠盐) |
COLO320 HSR人结直肠腺癌细胞 | BCA 蛋白定量检测试剂盒 |
COV434人卵巢颗粒肿瘤细胞 | BCA 蛋白定量检测试剂盒 |
CW-2人结肠癌细胞 | BCA 蛋白定量检测试剂盒(即用型) |
cx-1结肠癌细胞 | WonderOrange 蛋白定量试剂盒 |
D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞 | WonderOrange 蛋白定量试剂盒 |
D341 Med人脑髓母细胞瘤细胞 | 丽春红染色液(1×) |
DAMI人巨核细胞白血病细胞 | 考马斯亮蓝快速染色液(免脱色) |
DAOY人髓母细胞瘤细胞 | Western及IP细胞裂解液 |
DAUDI人Burkitt's淋巴瘤细胞 | RIPA裂解液(强,无抑制剂) |
DB人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞 | RIPA裂解液(强,无抑制剂) |
DLD-1人结直肠腺癌细胞 | 磷酸酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×) |
DMS 53人肺癌细胞 | 磷酸酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×) |
DMS 114人小细胞肺癌细胞 | 5637 (人膀胱癌细胞)蛋白酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100× in DMSO) |