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技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Acanthamoeba spp.PCR |
编号 | FS-R1005 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
GENEPAGEPLUS5%6MUREA*CLDPAK*5% GENE PAGE PLUS, 6 M尿素生物技术级500MLCOLD Mouseα2-plasmininhititor,α2-PIELISA试剂盒小鼠α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
80-43-3过氧化二异丙本;过氧化二枯茗;二枯茗过氧;硫化剂 DCPDicuMyl peroxide;Bis(α,α-diMe- thylbenzyl) peroxide;Bis(1-metxyl-1-pxenyletxyl)peroxide;Di(α,α-dimetxylbenzyl)peroxide;CuMyl peroxide Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA试剂盒山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
D-Serinemetxylesterxy7nochlorideD-丝酸盐酸盐25克BR,98% Humanai-Bburgdorleriaibody,BB-AbELISAKit人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
没食子蓝 Gallo,90% 1562-85-2 1G 通用试剂 人表皮细胞活化肽因子(CAPF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
固红ITR盐(+4℃) FcST RqD ScLT ITR 7280-14-9 豚鼠白介素1(IL-1)免疫试剂盒 Guinea Pig Ierleukin 1,IL-1 ELISA Kit
钛25克 微型RNA(miRNA)同位素探针制备试剂盒10次
110-62-3戊醛(+4℃)Valeraldehyde ELISAKitAmAC-1大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1规格:48T/96T
环辛酮250毫克保存:-20℃ 大鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA试剂盒 ,英文名: TNFRSF11A/RANK ELISA Kit
1,4-双[2-(2-... 1,4-Bis(2-methylstyryl)benzene,≥99.0% 13280-61-0 1G 通用试剂 人微量转铁蛋白(MTF)ELISA检测试剂盒Humanmicroansferrinuria,MTFELISAKit 96T/48T
槲皮素/栎精/槲黄素/橡精/栎皮黄素/栎精酸/楝精/3,5,7,3′,4′-五羟基黄酮二水合物/3,5,7,3′,4′-五羟基黄色素/3,3′,4′,5,7-五羟-2-苯基-1-氧杂-4-酮/3,5,7,3′,4′-五羟基-2-苯基苯并-4-酮/3,3,4,5,7-五羟基黄酮二水合物/Quercetin BR,97%, 10克 国产 大鼠不对称二甲基精氨酸(ADMA)免疫试剂盒 Rat asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
BOC-L-LeucinepOC-L-白酸10克BR,99% 大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒 ,英文名: ECF ELISA Kit
植酸钙 Phytin 3615-82-5 25G 通用试剂 人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA检测试剂盒HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 96T/48T
一三溴 Tribromofluoromethane,≥99.0% 353-54-8 5ML 通用试剂 甲型流感H7N7 HA 免疫试剂盒 Influenza A H7N7 HA ELISA Kit
结晶录化,英文名或英文缩写:litxium chloride monohydrate,级别:AR,99%,规格:1克 CLIAKitforPPELISAKit大鼠蛋酸酶规格:48T/96T
870-46-2卡巴酸叔丁酯tert-Butyl carbazate 石蜡切片组织P16蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒图片2-metxoxycarbonylthiopxene-3-boronic acid pinacol ester 1227664-10-9 伯氏疏螺旋体(BB)核酸检测试剂盒 48T
苯 Methyl benzoate,≥98% 93-58-3 100G 通用试剂 96MTELISAKit大鼠金属硫蛋白9696
Sodalime苏打石灰30毫升AR,99% 体液多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量检测试剂盒20次
3,3,-二基联本胺shēng huà shì jì容量:2~8℃100克 ELISAKitCREB人cAMP反应元件结合蛋白规格:48T/96T
54328-33-5皮肤素(冷藏运输)CHONDROITIN SULFATE B wo7ium SALT 大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。