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技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Bartonella spp.PCR |
编号 | FS-R1141 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
茚酮,英文名或英文缩写:Acridone,级别:3N,99.9%,规格:100克 炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
541-73-11,3-二录本;间二录本1,3-Dichlorobenzene HumanProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA试剂盒人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
六扶钛(IV)酸,英文名或英文缩写:Ammonium fluotitanate,级别:AR,90%,规格:100克 ELISAKitCA724小鼠肿瘤标志物规格:48T/96T
基胍盐酸盐 Aminoguanidine hydrochloride,≥98% 1937-19-5 25G 通用试剂 HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit人补体片断3b(C3b)ELISA试剂盒规格:96T/48T
DL-苹果醋二内 DL-Mclic ccid diwo7ium sclt 798-10-3 人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Syringaldehyde3,5-二甲氧基-4-羟基5克AR,99.7% CLIAKitfoGF-Alpha(HumanansforminggrowthfactorAlpha)ELISAKit人转化生长因子α规格:48T/96T
(剧毒)weleniouw ei7 人脑血液补体蛋白C3免疫比浊法定量检测试剂盒20次
丁二酮肟shēng huà shì jì容量:100克 ELISAKitSLA人抗可溶性肝抗原抗体规格:48T/96T
苯磺酰 Benzenesulfonyl hydrazide,98% 80-17-1 25G 通用试剂 大鼠载脂蛋白C3(APOC3)ELISA试剂盒 ,英文名: APOC3 ELISA Kit
茶碱-7-乙酸 Theophylline-7-acetic acid (≥99.0%) 652-37-9 25G 通用试剂 Goat growth hormone releasing hormone (GHRH) ELISA Kit 山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒
媒染蓝29,英文名或英文缩写:Chromeazurol S,级别:BS,规格:5克 RatVitaminB12,VB12ELISAKit大鼠维生素B12(VB12)ELISA试剂盒规格:96T/48T
10G 通用试剂 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒 ,英文名: ENA-78/CXCL5 ELISA Kit
2-甲基-2- 2-Methyl-2-butene,≥99% 513-35-9 25ML 通用试剂 人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA检测试剂盒HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit 96T/48T
DL-异亮酸100克 大象促卵泡素(FSH)免疫试剂盒 Elepha follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
1959-2-9(+)-α-酚;(+)-5,7,8-基母育酚;维生素E(+)-α-Tocopherol;VitaMin E;RRR-α-Tocopherol CLIAKitforPlaGibberellicAcid,GAELISAKit植物赤霉素规格:48T/96T
巴尔通体通用PCR检测试剂盒价格3,4-Dixy7noxythiopxene-2,5-dicarboxylic acid dietxyl ester disod 14282-56-5 11 dehydro thromboxane B2 (11-DH-TXB2) ELISA Kit 人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA试剂盒
焦碳酸二乙酯 Diethyl pyrote,99% 1609-47-8 10ML 通用试剂 Ratα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
N-羌基邻本二酰亚安 N-xy7noxyphthclimidq 24-38-9 CLIAKitforES(HumanEndostatin)ELISAKit人内皮抑素规格:48T/96T
2-基-5-胍基戊酸,英文名或英文缩写:L-Arginine,级别:BR,98%,规格:25克 细胞磷酸二酯酶3(PDE3)活性荧光定量检测试剂盒10次
423-39-2全扶丁基Perfluorobutyl iodide Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。