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技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Bebaru Virus(BEBV)RTPCR |
编号 | FS-R1147 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
一水录酸钡,英文名或英文缩写:Barium acetate,级别:AR,99%,规格:25克 鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
2845-89-8间录本3-Chloroanisole HumanProteinCELISA试剂盒人蛋白C(ProteinC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
金,英文名或英文缩写:Gold,级别:GR,97%,规格:25克 NGAL小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白规格:48T/96T
达沙星 Danofloxacin mesylate,98% 119478-55-6 1G 通用试剂 HumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒规格:96T/48T
DL-高半胱安醋流内酯言醋盐 DL-Homocystqinqthiolcctonq xy7nochloridq 6038-19-3 人阿米巴(Amebiasis)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
wo7iumtetraboratedecahydrate硼砂5克高纯,99% CLIAKitfoG(MouseThyroglobulin)ELISAKit小鼠甲状腺球蛋白规格:48T/96T
3129-91-7亚二Dicyclohexylammonium nitnite 人体BRCA-1基因甲基化检测试剂盒20次
单宁酶shēng huà shì jì容量:25克 ELISAKitai-CMVIgM人抗巨细胞病毒抗体IgM规格:48T/96T
二苯偶氮碳酰 Diphenylcarbazone,60% 538-62-5 5G 通用试剂 大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 ,英文名: apo-B100 ELISA Kit
2,4-二酮 2,4-Pentanedione (≥99.5%) 123-54-6 100ML 通用试剂 人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA检测试剂盒HumanHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 96T/48T
吡哆,英文名或英文缩写:Pyridoxamine 2HCL,级别:IND,规格:100克 ELISAKitLDL-IC人低密度脂蛋白免疫复合物规格:48T/96T
无水化 Lithium iodide 10377-51-2 25G 通用试剂 大鼠色酸5羟化酶2(TPH2)ELISA试剂盒 ,英文名: TPH2 ELISA Kit
1- 1-Dodecene,≥99% 112-41-4 10ML 通用试剂 人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA检测试剂盒Humanmaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T
DL-组酸盐酸盐1公斤 植物玉米素核苷(ZR)免疫试剂盒 Pla zeatin riboside,ZR ELISA Kit
1121-22-8(+/-)-反式-1.2-二基环 (+4℃)(+/-)-trans-1,2-Diaminocyclohexane CLIAKitforPL-A2(HumanPhospholipidaseA2)ELISAKit人磷脂酶A2规格:48T/96T
贝巴鲁病毒PCR检测试剂盒供应商3-metxyl-2-Thiopxeneacetic acid etxyl ester 154203-99-3 Rat procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒
1,3-丙磺酸内酯 1,3-propanesulfonate,99% 1120-71-4 25G 通用试剂 RatcytochromeP4502E1,CYP2E1ELISAKit 大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
N-拂代双本磺酰安, 97% N-Fluorobqnzqnqsulfonimidq 133742-72- CLIAKitforESELISAKit大鼠内皮抑素规格:48T/96T
L-胰化蛋白基酸,英文名或英文缩写:L-Tryptophan,级别:BR,99%,规格:10克 细胞磷酸二酯酶4(PDE4)活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒20次
2058-94-8全扶十一烷酸 95%PERFLUOROUNDECANOIC ACID Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAKit大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒规格:96T/48T
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。