产品名称： 贝氏贝诺孢子虫PCR检测试剂盒图片
英文名称：Besnoitia besnoitiPCR
编号：FS-R1148

贝氏贝诺孢子虫PCR检测试剂盒图片实时荧光定量PCR（Q-PCR）技术利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，终对起始模板进行精确的定量分析。实时荧光定量PCR的检测方法分为SYBRGreen I法和TaqMan探针法等。在研究领域中，qPCR广泛应用于细胞中的基因拷贝数的测定，其常与反转录PCR（RT-PCR）一起使用以精确测定基因表达量，如通过检测细胞mRNA水平可以测定不同环境或药物作用下基因表达的情况。

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
u 运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。
【使用方法】:
注：所有试剂使用前需*解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
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  RT -PCR即逆转录-聚合酶链反应，是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应（PCR）相结合的技术。分为两步法和一步法RT-PCR。
       一步法RT-PCR能克隆微量mRNA而不需构建cDNA文库,即cDNA合成与PCR反应在同一Buffer及酶中进行,一步法完成,省略了cDNA与PCR之间的过程。一步法需要基因特异性引物，适合从大量的RNA样本中得到少量基因（数目）的信息。
       两步法RT-PCR:首先用反转录酶AMV、M-Mulv或TthDNA聚合酶合成cDNA,然后以cDNA为模板进行PCR。两步法即先进行cDNA合成再进行PCR操作，适合从少量的RNA样本中得到大量基因（数目）的信息。

技术参数：
1. 符合行业标准SN/T 1686-2005《新城疫病毒中强毒株检测方法：荧光RT-PCR法》的检测要求，可用于禽肉、禽类组织脏器、禽类排泄和分泌物，及其泄殖腔和咽喉拭样中新城疫病毒的检测。
2. 灵敏度：对于接种的鸡胚尿囊液，检测的高稀释度可达10-8～10-7，与鸡胚病毒分离方法的灵敏度接近。定量检测线性范围可达10-1010拷贝/ml。
3. 特异性：采用新基因序列数据库设计，并通过系统验证，新城疫病毒RT-PCR能够检测所有已知新城疫病毒毒株。对于其它禽类感染因子，本试剂盒检测结果为阴性。
4. 产品盒组成：（不包括新城疫病毒RNA提取试剂,用户可采用通用型病毒RNA提取试剂盒或试剂盒推荐的提取方法。） 组成成份（48T/kit） 规格 数量　 RNA提取液 30ml 1瓶 DEPC水 5 ml 1瓶 新城疫病毒RT-PCR一步法反应液 920ul 1管 逆转录酶（5U/ul） 48ul 1管 Taq HS酶（5U/ul） 24ul 1管 新城疫病毒阳性对照 100ul 1管新城疫病毒阴性对照 100ul 1管 使用说明书 一份。

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