细胞冻存注意事项：
(1)  细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2)  保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3)  细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4)  储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。

操作步骤:

(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。

(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。

公司正在出售的产品：

DHX58蛋白抗体磷酸化紧密连接蛋白6抗体　英文名；phospho-Claudin 6 (Tyr219)

DHX8蛋白抗体磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体　英文名；phospho MCSF Receptor (Tyr699)

DHX螺旋酶抗体磷酸化卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原相互作用蛋白1抗体　英文名；phospho-MLF1 Interacting Protein (Thr78)

DIAPH2蛋白抗体磷酸化酪蛋白激酶1γ1+γ2+γ3抗体　英文名；phospho-CSNK1G 1+2+3 ( Tyr263)

DIEXF蛋白抗体磷酸化酪蛋白激酶Ⅱβ亚单位抗体　英文名；phospho-CK II beta (Ser209)

DIM-7蛋白抗体磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗体　英文名；phospho-Caseine Kinase 1 alpha(Tyr294)

DIMT1L蛋白抗体磷酸化类固醇受体辅助活化因子-3　英文名；Phospho-SRC3 (Thr24)

DIP13β抗体磷酸化类固醇受体激活蛋白2抗体　英文名；phospho-KAT13C (SER736)

DIP2B蛋白抗体磷酸化离子通道蛋白Kv1.3抗体　英文名；phospho-KCNA3 (Tyr135)

DIP2C蛋白抗体磷酸化离子通道蛋白Kv3.1抗体　英文名；phospho-KCNC1 (Ser503)

DIRAS2蛋白抗体磷酸化粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体　英文名；phospho-IL3RB (Tyr766)

DISC1 C端抗体磷酸化淋巴细胞胞浆蛋白2抗体　英文名；phospho-SLP76 (Tyr113)

DISC1 N端抗体磷酸化淋巴细胞衍生C-型凝集素抗体　英文名；phospho-C-REL (Ser503)

DjC8蛋白抗体磷酸化淋巴增强因子-1抗体　英文名；phospho-LEF1 (Ser42)

CRFK（猫肾细胞）DKK2单克隆抗体磷酸化磷酸神经膜抗体　英文名；phospho-FXYD1 (Ser83)

DKK2抗体磷酸化磷脂蛋白受体Dab1抗体　英文名；Phospho-Dab1 (Tyr198)

DLST蛋白抗体磷酸化磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗体　英文名；phospho-PI3 Kinase p110 beta (Ser1070)