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实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | |
英文名称 | Ovine Astrovirus 2(OAstV)2RTPCR |
编号 | FS-R1919 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
琼脂糖凝胶4B蛋白A5克 鹅双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
TrisBUFFER SOLUTION PH = 6,00 (20 °C) (potewwium DIxy7noGEN PHOSPHATE/wo7ium xy7noXIDE) 人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)免疫试剂盒 Human platelet-associated immunoglobulins,PAIg ELISA Kit
ETHIDIUMBROMIDESTOCKSOL.溴化乙锭溶液生物技术级10MLRT 人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒 ,英文名: ALA/LCA ELISA Kit
2--3-胺 2-Fluoro-3-methylaniline,98% 1978-33-2 1G 通用试剂 RatHyaluronicacid,HAELISA试剂盒大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
焦磷酸钾/焦磷酸四钾/Potassium pyrophosphate AR,99% 500克 国产/进口 HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA试剂盒人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ALCIANBLUE阿利新蓝 8 GX高级深蓝紫色粉末RTsigma Bovine ciate syhase (CS) ELISA Kit 牛柠檬酸合成酶(CS)ELISA试剂盒
磷酸二氢钠 Sodium phosphate monobasic dihydrate,... 13472-35-0 100G 通用试剂 RatC-PeptideELISAKit 大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
2,2-二甲基丁烷 2,2-Dimethylbutane,≥99% 75-83-2 25ML 通用试剂 CLIAKitforHPA(HumanHeparanase)ELISAkit人乙酰肝素酶规格:48T/96T
Monensinwo7ium莫能星钠1克BR,99% 细胞PIM1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
16731-55-8偏重亚钾;焦亚钾;三缩二原钾potewwium Metabisulfite ELISAKitS-100大鼠S100蛋白规格:48T/96T
2-nepxtxelenemetxanamine, 6-metxoxy-a-metxyl-, (aR)- 132951-65-6 CLIAKitforFLUA(HumanInfluenzavirusesA)ELISAKit人流感病毒A规格:48T/96T
3,4-二氧噻吩 3,4-Ethylenedioxythiophene ,≥97.0% 126213-50-1 5G 多肽试剂 细胞基因敲除或插入20样本
脱羧酶对照试验培养基10克RT RatPeosidineELISAKit大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA试剂盒规格:96T/48T
油酸锌100克 大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
101-89-3固深红GBC盐(-20℃)CI 37210 人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)免疫试剂盒 Human HLAMP-2 ELISA Kit
绵羊星状病毒型PCR检测试剂盒图片5-(2-metxyl-1,3-thiazol-4-yl)-2-thiopxene 690631-93-7 ELISAKitBV猴B病毒规格:48T/96T
2,4-二苯基异酸酯 2,4-Difluorophenyl isocyanate,99% 59025-55-7 1G 通用试剂 大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
十氢/烷/双环(4.4.0)癸烷/十氢化/全氢化/Decahydro AR,99.5% 500毫升 国产/进口 人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)免疫试剂盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA Kit
Chitin几丁质100毫克高,97% MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
15026-17-2单叔丁基琥珀酸酯MONO-TERT-BUTYL SUCCINATE 97% 石蜡切片组织PASE-2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。