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上海市所在地
产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞抗AChE;AE-2 | 货号 | AXB10534 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名 | AE-2:AE2 |
分类 | 小鼠系 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍:
别称 | E2 |
种属 | 小鼠 |
年龄(性别) | 不详 |
组织来源 | B淋巴细胞;淋巴瘤 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
详情简介 | 用纯化的人红细胞乙酰脂酶免疫实验动物,并将脾细胞与SP2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合。产生的抗体与人及猴的乙酰脂酶结合,但AE-2细胞反应位点与AE-1的抗原决定簇不同。检测发现AE-2细胞短肢畸形(鼠痘)病毒阴性。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推荐传代比例 | 3×10^5-1×10^6cells/mL |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
冻存条件 | |
冻存液 | 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO |
温度 | 液氮 |
培养条件 | |
气相 | 空气,95%;CO2,5% |
温度 | 37℃ |
注意事项 | 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。 |
别称公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞冻存注意事项:
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候,这时细胞生长状态好,细胞数量也多,并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样,用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬,活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml ),加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀,分装到冻存管,冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中, 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中, DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ,某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍,再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说,每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时,再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间,细胞可保存在气态层或浸入液氮中,如果可能最好保存在气态层,因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮,需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
公司正在出售的产品:
6号染色体开放阅读框20抗体甲基化样蛋白21D抗体 英文名;METTL21D
6号染色体开放阅读框211抗体甲基化样蛋白22抗体 英文名;METTL22
6号染色体开放阅读框222抗体甲基化样蛋白2A抗体 英文名;METTL2A
6号染色体开放阅读框223抗体甲基化样蛋白2B抗体 英文名;METTL2B
6号染色体开放阅读框225抗体甲基化样蛋白4抗体 英文名;METTL4
6号染色体开放阅读框226抗体甲基化样蛋白7A抗体 英文名;METTL7A
6号染色体开放阅读框25抗体甲基化样蛋白7B抗体 英文名;METTL7B
6号染色体开放阅读框28抗体甲基化样蛋白8抗体 英文名;METTL8
6号染色体开放阅读框35抗体甲基化样蛋白9抗体 英文名;METTL9
6号染色体开放阅读框50抗体甲基化组蛋白H3 (tri methyl K36) 单克隆
小鼠杂交瘤细胞抗AChE;AE-2抗体 英文名;Histone H3 (tri methyl K36)
6号染色体开放阅读框52抗体甲基化组蛋白H3(di methyl K27)单克隆抗体 英文名;Histone H3(di methyl K27)
6号染色体开放阅读框57抗体甲基化组蛋白H3(di methyl K36)单克隆抗体 英文名;Histone H3(di methyl K36)
6号染色体开放阅读框58抗体甲基化组蛋白H3(di methyl K79)单克隆抗体 英文名;Histone H3 (di methyl K79)
6号染色体开放阅读框62抗体甲基化组蛋白H3(di methyl K9)单克隆抗体 英文名;Histone H3(di methyl K9)
操作步骤:
(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。