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实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

人 EphB6 / EPHB6 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 TNFRSF4 / CD134 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 CPB1 / PCPB 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 DR6 / TNFRSF21 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 CD102 / ICAM2 人细胞裂解液 (

WRL68 (肝细胞)50T 沙门氏菌invA基因(284bp)常规PCR检测试剂盒  低温运输，-20℃保存氯硝胺孟加拉红琼脂进口、国产DRBC Agar250克食品中霉菌及酵母菌的分离培养

50T 马铃薯Cry3c基因PCR检测试剂盒   低温运输，-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Acidic mammalian chitinase

厌氧菌琼脂 Anaerobic Agar 250g 1.56-100 nmol/L ELISA Kit for S-Adenosyl methionine

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万 Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin 10ml*20支/包 0.156-10 ng/mL 人CD109抗原ELISA试剂盒

吐温稀释液 Lecithin polysorbate(LP)diluent 250g双料乳糖胆盐培养基进口、国产Twofold Lactose Bile Salt Broth250克用于化妆品中粪大肠菌群的测定

1瓶 SW1353株 SW1353 低温运输和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Mucosal addressin cell adhesion molecule 1

250mL RIPA Buffer with Triton, 1X RIPA Buffer with Triton, 1X 常温保存

10 μg  Okadaic acid钾盐（PP1和PP2A抑制剂） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 119

1g 异丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷 IPTG     4℃避光保存 0.156-10 nmol/L ELISA Kit for Human Glutamate--cysteine ligase catalytic subunit

1mL PCR抑制物清除剂 PCR Inhibitor Erasol 低温运输，-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人芳基硫酸酯A(ASA)ELISA试剂盒

2 ug pET-50b(+) pET-50b(+) 低温运输，-20℃保存 3.12-200 U/L 人刺鼠色蛋白相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。