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培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | BJ-X96659 |
商品介绍:
名称 H22 (小鼠肝癌细胞) 别称Hepatoma-22; Hepatoma 22 种属小鼠 年龄(性别)不详 组织来源肝;肝癌 生长特性悬浮细胞 细胞形态淋巴母细胞样 背景描述H22细胞是分离自小鼠腹水,由大连医科学院建立。 生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推荐换液频率2~3次/周 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 注意事项该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神经 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 KIAA1279 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 BRCA2 / BCCIP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 PILR-alpha / PILRA 人细胞裂解液 (阳性对照)
H22 (小鼠肝癌细胞) 120次 酸性检测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存卵黄培养基基础进口、国产Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base用于菌的分离培养(Japan方法)250
营养盐琼脂(AATCC30) Nutrient-salts Agar 250g
100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1
50mL Potassium Acetate Solution(乙酸钾溶液),1M Potassium Acetate Solution,1M 常温保存
三糖铁琼脂培养基 Triple SugarIronAgar Medium 250g 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Nesfatin-1
10次 克必隆eTS RNA荧光探针制备试剂盒 0.156-10 ng/mL 人高迁移率族蛋白HMGI-C( High mobility group protein HMGI-C) ELISA试剂盒
大豆酪蛋白消化物培养基(USP)颗粒 Soybean Casein Digest Medium 250g无脂肪奶粉进口、国产Nonfat-Dried Milk250克蛋白组级
2 ug pcDNA3.1 tdTomato pcDNA3.1 tdTomato 低温运输,-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Chorionic somatomammotropin hormone
10次 百万碱基级动物DNAout 0.312-20 ng/mL 人线粒体天冬谷载体同工型2(ARALAR2/SLC25A13)ELISA试剂盒
2 ug pShuttle-IRES-hrGFP-2 pShuttle-IRES-hrGFP-2 低温运输,-20℃保存
1瓶 K562株 K562 低温运输和保存 0.125-8 ng/mL 人核受体辅助抑制因子2(NCOR2)ELISA试剂盒