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上海市所在地
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
紫外分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01S9549 |
商品介绍:
测定意义:
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
测定原理:
NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
人 HS2ST1 基因全长ORF克隆
人 PGRMC1 基因全长ORF克隆
人 AICDA 基因全长ORF克隆
人 YKT6 基因全长ORF克隆
人 RGS1 基因全长ORF克隆
人 NCALD 基因全长ORF克隆
人 NCS1 基因全长ORF克隆
人 DCTN6 基因全长ORF克隆
人 CNN1 基因全长ORF克隆
人 DGKE 基因全长ORF克隆
NAD苹果酸酶测试盒50管/48样小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)免疫试剂盒*直销
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫试剂盒进口、组装
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) 免疫试剂盒进口、分装
小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)免疫试剂盒现货供应
小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)免疫试剂盒*直销
小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)免疫试剂盒进口、组装
小鼠载脂蛋白H(Apo-H)免疫试剂盒进口、分装
小鼠载脂蛋白E(Apo-E)免疫试剂盒现货供应
小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)免疫试剂盒*直销
小鼠载脂蛋白B100(Apo-B100)免疫试剂盒进口、组装
小鼠载脂蛋白B(APOB)免疫试剂盒进口、分装
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。