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我司供应的elisa进口试剂盒免费代测,全程ELISA试剂盒实验技术指导,免费代做实验,索取产品说明书。
规格:96T/48T
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断
运输:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)
试剂盒种属:羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
产品名称 | 人类白细胞抗原C(HLA-C)elisa进口试剂盒 |
英文名称 | Human leukocyte antigen C (HLA-C) ELISA Kit |
货号 | BJ-G10568 |
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA进口试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 芍药苷(标准品)质量规格:>98%,分析标准品Paeoniflorin
人少突胶质前体细胞cDNAHOPC cDNA芍药苷(40%)质量规格:≥40%Paeoniflorin
MCF-7细胞,人癌细胞 人肺鳞癌细胞,LTEP-s细胞 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)芍药苷(50%)质量规格:≥50%,BRPaeoniflorin
犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild芍药苷(90%)质量规格:≥90%Paeoniflorin
PLAT Others Human 人 tPAβ 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))质量规格:>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-联本四,英文名或英文缩写:DAB,级别:BR,85%,规格:100克
SGC-7901细胞,胃腺癌细胞 人食管癌细胞,Eca-109细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亚磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人细胞裂解液 (阳性对照) 失水苹果1,英文名或英文缩写:MA,级别:CP,规格:25克
人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine
人羊膜细胞;WISHHEPPS(EPPS)HEPPS (EPPS)超级25G16052-06-5RT
犬胸腺细胞;cf2Th SRSV转化的3T3细胞,SRSV/3T3细胞 CCC-Ca761-03细胞,小鼠癌细胞2-安基庚烷;2-庚安;1-基己安 2-cMinohqptcnq;2-HqptylcMinq;1-MqthylhqxylcMinq;Hqptin;Hqptqdrinq;TucMinq;TucMinohqptcnq;2-HqptcncMinq; 13-8-0
人胚肺二倍体细胞;KMB-17GENEPAGE8%EZSQUEEZE*CLDPAK* 8% GENE PAGE, 挤压式瓶装生物技术级10X75MLCOLD
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) -2-羧酸,英文名或英文缩写:TCH,级别:AR,99.5%,规格:250克
Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞盐酸N-(1-Naphthyl)etxylenediamine dixy7nochloride
人类白细胞抗原C(HLA-C)elisa进口试剂盒DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人细胞裂解液 (阳性对照) 瑞替加滨Retigabine质量规格:HPLC>95%,
肾小管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)利巴韦林Ribavirin质量规格:>99%,BR
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 利巴韦林(标准品)Ribavirin质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3硫酸核糖霉素Ribostamycin Sulfate质量规格:≥630µg/mg,BR,可用于细胞培养
GLC-82-TK细胞,人肺腺癌细胞(转染TK基因的GLC-82细胞) 非洲绿猴肾细胞,COS-1细胞 CL-0066COLO 205(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2利福布丁Rifabutin 质量规格:>97%,BR
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。