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NADMDHNAD苹果酸脱氢酶微量法
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2022-04-11上海市
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产品简介
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详细信息
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商品介绍：
测定意义 MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。 测定原理： NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒，质量信得过产品，售后完善。服务于高校及免疫学科研单位，竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
规格：100管/96样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63216
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
紫色直丝链霉Sheep CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit
秀珍菇Sheep IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit
节杆属Sheep AP (Allopregnanolone) ELISA Kit
香菇Sheep AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit
中国汉纳酵母Sheep COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit
黑曲霉Sheep ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit
干酪乳杆Sheep ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
卤水糖螺Sheep Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
汉逊德巴利酵母Sheep PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit
钟器腐霉Sheep PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit
柑橘青霉Sheep PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit
北京芽孢杆Sheep NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit
黑根霉Sheep IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit
欧文氏属GHRL (Ghrelin) ELISA Kit
固氮GHRL (Ghrelin/Obestatin Preprohormone) ELISA Kit
NADMDHNAD苹果酸脱氢酶检测试剂盒微量法乙 for HPLC, >99.0%(GC)，含2%乙作稳定剂气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：200m2/g;氯化物：0.01Anti-IFN- Beta/FITC 荧光标记抗人干扰-β抗IgG
二甲基黄 indicator气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：300m2/g；粒径：7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC 荧光标记干扰-γ抗体IgG
砷试剂 AR,99.0%气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：170m2/g；粒径：7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 荧光标记抗大、小鼠IFN-γ抗IgG
1,2-二氯乙烷 standard for GC,>99.9%(GC)气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：120m2/g；粒径：7-40nAnti-IFNGR2/FITC 荧光标记干扰-gamma受体2抗体IgG
1,3-二基－4-(5-溴-2-吡偶氮) AR疏水气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):230m2/g;;粒径:7-40nAnti-IFN- Gamma/HRP 辣根过氧化物标记鼠抗人干扰-γ/IFN-gamma单克隆抗体IgG
2-(3,5-二溴-2-吡偶氮)-5-二乙基 AR气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：100m2/g；粒径：7-40nAnti-IFNGR1/CD119/FITC 荧光标记干扰-gamma受体抗体IgG
二乙基乙基纤维-1 TLC二氧化硅 99.5%,30±5nmAnti-IGC/FITC 荧光标记兔抗非洲爪蟾IGC抗体IgG
二甲基黄 分析标准品，≥98.0% (HPLC)二氧化硅 99.5%,15±5nmAnti-IGF-I/FITC 荧光标记标记胰岛样生长因子-I抗体IgG
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
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