培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低  1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

 产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、科技售后服务标准。

      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

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细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

D-甘露醇羟胺-O-磺酸 97%二二醇单[(1,1,3,3-四基基)]醚pUNO1-hSLAMF5c

结晶苯酚6-羟基吲哚 98%辛基聚氧烯醚pUNO1-hSLAMF6b

结晶苯酚4-羟基吲哚 98%Tris平衡苯酚pUNO1-hSLAMF7a

钨酸钠5-羟基吲哚 98.0%磷酸三间酯pUNO1-hSLPI

醋酸镁二吲哚 99%三碱式磷酸钠pUNO1-hSMAD2

醋酸镁2-基吲哚 98%TRIS-HC1缓冲液pUNO1-hSMAD3

醋酸镁2-基吲哚啉 99%三(羟基)氨基烷盐酸盐pUNO1-hSMAD4

40%烯酰胺溶液5-氧基吲哚 99%三羟基氨基烷碳酸盐pUNO1-hSMAD6

AMP缓冲液2-吲哚 99%三羟基氨基烷醋酸盐pUNO1-hSMAD7

AMP缓冲液四溴噻吩 99%三水磷酸钾pUNO1-hSMARCB1b

大鼠表皮角质形成细胞说明书双(六氟酰酮)合铜(II) 98%ADPNa2；二酸腺苷二钠氧化铁黄Rat MIP-1β(Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit

Rat MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit

双(6,6,7,7,8,8,8,-七氟-2,2-二基-3,5-辛二酮酸)铜 99.99%Vincamine；长春胺氧化铁黑Rat MIγ/CXCL9(Monocyte Interferon Gamma Inducing Factor) ELISA Kit

Rat MMP-1(Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit

(二基)膦 97%trans-Zeatin；反-玉米素氧化铁红Rat MMP-10(Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit

Rat MMP-12(Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit

(二基)膦 95%Phorbol 12-Myristate 13-Acetate；佛波酯六偏酸钠Rat MMP-13(Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit

Rat MMP-17(Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit

二异基膦 98%L-Stepholidine；左旋千金藤啶碱 金红石钛Rat MMP-24(Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit

Rat MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit

环戊二烯基双(三膦)钌(II) 98%Linezolid；吗啉恶酮/利奈唑胺金红石钛Rat MMP-7(Matrix Metalloproteinase-7) ELISA Kit

Rat MMP-8(Matrix Metalloproteinase-8) ELISA Kit

羰基三(三膦)钌(II) 97%Linezolid；吗啉恶酮/利奈唑胺锐钛钛Rat MPIF2(Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit

Rat MT(Melatonin) ELISA Kit

羰酰二三(三膦)钌(II) 99%Linezolid；吗啉恶酮/利奈唑胺麻杏石甘口服液Rat MUC2(Mucin 2) ELISA Kit

Rat MYO(Myoglobin) ELISA Kit

(茚基)双(三膦)钌(II) Levamisole Hydrochloride；盐酸左旋咪唑氧化镁Rat N-ACHR(Nicotinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit

Rat NAGase(N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase) ELISA Kit

二羰基胺四环戊二烯钌 96.0%D-β-Tocopherol；D-β-亚麻籽胶Rat NAP-2(Neutrophil Activating Protein-2) ELISA Kit

Rat NCAD(Neural Cadherin) ELISA Kit