PCR检测方法两项团标征求意见
- 2023/3/20 13:36:06 24641
- 来源：仪表网
【仪表网 行业标准】近日，由华南农业大学负责起草的《产酸克雷伯杆菌 PCR 检测方法》和《奇异变形杆菌 PCR检测方法》编制完成并征求意见，请研究提出修改意见，并填写《广东省动物学会团体标准征求意见反馈表》，于2023年4月17日前通过邮件反馈至gdsdongwuxuehui@163.com。
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)是体外酶催化合成特异 DNA片段的方法，模板DNA先经高温变性成为单链，在DNA 聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在 DNA 聚合酶的作用下以四种dNTP为底物，使引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增。
《产酸克雷伯杆菌 PCR检测方法》
本文件规定了实验动物大小鼠产酸克雷伯杆菌的PCR检测方法。本文件适用于实验动物大小鼠产酸克雷伯杆菌核酸定性检测。
用合适的方法提取样本中的DNA，分别针对病原菌16s RNA或其他保守的基因设计特异的引物，通过PCR对模板进行扩增，根据PCR反应结果分析该样品中是否含有某种病原菌。
仪器设备
1PCR仪。
2电泳仪。
3凝胶成像分析系统。
4普通离心机。
5恒温孵育器。
6漩涡振荡仪。
7组织匀浆器。
8生物安全柜。
9超净工作台。
10冰箱(-20C)。
11冰箱(-80C)。
12微量移液器:0.1 uL～2.5uL，1 uL～10 uL，10 uL～100 uL，20 uL～200 uL，100 uL~1000 uL。
13采样工具:剪刀、镊和灭菌棉拭子等。
《奇异变形杆菌 PCR 检测方法》
本文件规定了实验动物大小鼠奇异变形杆菌的PCR检测方法。本文件适用于实验动物大小鼠奇异变形杆菌核酸定性检测。
用合适的方法提取样本中的DNA，分别针对病原菌16s RNA或其他保守的基因设计特异的引物，通过PCR对模板进行扩增，根据PCR反应结果分析该样品中是否含有某种病原菌。
仪器设备
1PCR仪。
2电泳仪。
3凝胶成像分析系统。
4普通离心机。
5恒温孵育器。
6漩涡振荡仪。
7组织匀浆器。
8生物安全柜。
9超净工作台。
10冰箱(-20°C) 。
11冰箱(-80°C)。
12微量移液器: 0.1 uL~2.5 uL, l uL~10 uL，10 uL～100 uL,20 uL～200 uL，100 uL~1000 uL。
13采样工具:剪刀、镊和灭菌棉拭子等。
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