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产品名称 | 5637 (人膀胱癌细胞) |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X96322 |
商品属性:
名称 5637 (人膀胱癌细胞) (STR鉴定正确) 种属 人类 年龄(性别) 男性,68岁 组织来源 膀胱;癌 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 背景描述 5637细胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 生物安全等级 1 生长培养基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例 1:3-1:4 推荐换液频率 2~3次/周 倍增时间 ~24-36小时 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃ 致瘤性 Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 注意事项 该细胞较难消化,注意延长消化时间,消化到细胞收缩变圆,轻拍培养瓶侧边,细胞可以滑落方可终止消化。 |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
293T [HEK-293T](人胚肾细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
3T3-L1 (小鼠胚胎成纤维细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
4T1 (小鼠乳腺癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
6T-CEM (人T细胞白血病细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
769-P (人肾细胞腺癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
786-O [786-0] (人肾透明细胞腺癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
95-D [PLA-801D] (人高转移肺癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
A172 (人胶质母细胞瘤细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
A2780 (人卵巢癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
A-375 (人恶性黑色素瘤细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
A-431 (人表皮癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
A549 [A-549] (人非小细胞肺癌细胞) 1×10⁶cells/T25培养瓶 细胞系
Mouse thyrotropin-releasing hormone ELISA KIT 96T/48T 小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)
Mouse CRH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)
Mouse Insulin Receptor β(ISR-β)ELISA KIT 96T/48T 小鼠胰岛素受体β(ISR-β)
Mouse HbA1c ELISA Kit 96T/48T 小鼠糖化血红蛋白(HbA1c)
Mouse lymphocyte function associated antigen-3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠LFA-3(CD58)
Mouse HLA-2 ELISA Kit 96T/48T 小鼠组织相容性抗原(HLA-2)
Mouse HLA-1 ELISA Kit 96T/48T 小鼠组织相容性抗原(HLA-1)
Mouse Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit 96T/48T 小鼠骨成型蛋白质7(BMP-7)
Mouse HA ELISA Kit 96T/48T 小鼠透明质酸(HA)
Mouse 25(OH)D3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠25羟基(25(OH)D3)
Mouse Myoglobin ELISA Kit 96T/48T 小鼠肌红蛋白(MYO)
Mouse Thromboxane B2 ELISA Kit 96T/48T 小鼠血栓素(TXB2)
Mouse acetylcholine ELISA Kit 96T/48T 小鼠乙酰(ACh)
Mouse Tissue Polypeptide Antigen ELISA Kit 96T/48T 小鼠组织多肽抗原(TPA)
Mouse t-PA ELISA Kit 96T/48T 小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)
5637 (人膀胱癌细胞)Mouse β-Thromboglobulin ELISA Kit 96T/48T 小鼠β血小板球蛋白(β-TG)
Mouse dihy-drotestosterone ELISA Kit 96T/48T 小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒
Mouse SPE(IgG,M) ELISA Kit 96T/48T 小鼠抗体(SPE)
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。